單寧含量檢測(cè)試劑盒操作原理是什么!
簡(jiǎn)介:
單寧是葡萄酒中所含有的兩種酚類化合物其中的一種物質(zhì),尤其在紅葡萄酒中含量較多,有益于心臟血管疾病的預(yù)防。葡萄酒中的單寧一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡發(fā)酵而來(lái),或者是因?yàn)榇嬗谙鹉就皟?nèi)而萃取橡木內(nèi)的單寧而來(lái)。單寧的多少可以決定酒的風(fēng)味、結(jié)構(gòu)與質(zhì)地。缺乏單寧的紅酒質(zhì)地輕薄,沒(méi)有厚實(shí)的感覺(jué),薄若萊紅酒就是典型代表。單寧豐富的紅酒可以存放經(jīng)年,并且逐漸醞釀出香醇細(xì)致的陳年風(fēng)味。當(dāng)葡萄酒入口后口腔感覺(jué)干澀,口腔黏膜會(huì)有褶皺感,那便是單寧在起作用。
產(chǎn)品說(shuō)明:
單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有*的化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性,如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合;能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過(guò)敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng),生成藍(lán)色化合物,在760nm 處有大吸收峰。
檢測(cè)原理:
測(cè)定原理:?jiǎn)螌幵趬A性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng),生成藍(lán)色化合物,在760nm 處有大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
操作步驟:
一、 單寧的提?。?br />按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL蒸
餾水),充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP 管中,80℃水浴提取30min,8000 g,25℃離心10 min,取上清液待
測(cè)。
二、 測(cè)定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm,蒸餾水調(diào)零;試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min
以上。
混勻,室溫靜置30min,760nm 處讀取吸光值A(chǔ),ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照,對(duì)照管只要做一管。
三、 單寧含量計(jì)算:
1、 標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.008x - 0.0021;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/mL),y 為吸光值。
2、 按樣本鮮重計(jì)算:
單寧含量(μg /g 鮮重)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(W×V1÷V2)=125×(ΔA+0.0021) ÷W。
3、 按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單寧含量(μg /mg prot)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(V1×Cpr)=125×(ΔA+0.0021) ÷Cpr。
V1:加入樣本體積,0.015mL;V2:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;
W:樣本鮮重,g。
單寧含量檢測(cè)試劑盒操作原理是什么!
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