ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的試驗確診辦法。由于其試劑安穩(wěn)、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等要素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗的各范疇中。ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗小鼠磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)ELISA檢測試劑盒。
長處：
一、、活絡(luò)、特異的抗體；
二、安穩(wěn)的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附功能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、安排勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、節(jié)約試驗經(jīng)費(fèi)。
運(yùn)用辦法：
1、 血清：操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞敏捷小心地別離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 安排勻漿：將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存：假如樣品不當(dāng)即運(yùn)用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，防止重復(fù)冷凍。盡可能的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應(yīng)在室溫下凍結(jié)并保證樣品均勻地充沛凍結(jié)。
在ELISA中，進(jìn)行各項試驗條件的挑選是很重要的，其間包含:
（1）　固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體，在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選：用等量抗原包被，在同一試驗條件下進(jìn)行反響，調(diào)查其顯色反響是否均一性，據(jù)此判明其吸附功能是否杰出。
（2） 包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃ 18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相一起，調(diào)查陽性標(biāo)本的OD值。挑選OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。關(guān)于大都蛋白質(zhì)來說一般為1～10μg/ml。
（3）　酶符號抗體作業(yè)濃度的挑選：首先用直接ELISA法進(jìn)行開始效價的滴定（見酶符號抗體部份）。然后再固定其它條件或采納“方陣法”（包被物、待檢樣品的參閱品及酶符號抗體分別為不同的稀釋度）在正式試驗體系里地滴定其作業(yè)濃度。
（4）　酶的底物及供氫體的挑選：對供氫體的挑選要求是價廉、安全、有明顯地顯色反響，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌效果，應(yīng)留意防護(hù)。有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、活絡(luò)度高的供氫體，如TMB和ABTS是現(xiàn)在較為滿足的供氫體。底物效果一段時刻后，應(yīng)參加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反響。一般底物效果時刻，以10-30分鐘為宜。底物運(yùn)用液有必要新鮮制造，尤其是H2O2在臨用前參加。
    elisa試劑盒回收率是反響待測物在樣品剖析過程中的丟失的程度，丟失越少，回收率越高，假如作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出規(guī)范數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個與實在成分有親近的聯(lián)系，闡明辦法的度。比方水中總無機(jī)氯含量測定，樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L，取100mL被測水樣品，參加0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯規(guī)范樣品，測守時疏忽體積變化，假如測定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L，則以為回收率為98%。
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