加壓毛細管電色譜怎樣檢測黃曲霉毒素
黃曲霉毒素是由黃曲霉等產(chǎn)生的次生代謝物,廣泛存在于花生、玉米及其制品中,目前已發(fā)現(xiàn)20種之多,以B1、B2、G1、G2為常見。研究表明,人食用被黃曲霉毒素污染的食品后,會引發(fā)肝癌和胃癌等疾病。我國在國標GB《食品中真菌毒素*》中對其含量進行了嚴格的規(guī)定。
目前,分析AFs的常規(guī)方法有薄層色譜法(TLC)、酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)、液相色譜法(HPLC)。其中TLC法靈敏度和選擇性不高;ELISA有交叉反應特性,且不能定性;HPLC法通常使用熒光檢測器或質(zhì)譜檢測,試樣耗費量大,分析時間較長。因此有必要發(fā)展一種更加適用于AFs檢測的分析方法。
加壓毛細管電色譜是近年發(fā)展起來的一種新興微分離技術,具有高柱效、高選擇性、高分辨度、快速分離、樣品和試劑用量少的特點。pCEC已廣泛應用于農(nóng)殘分析、藥物分析、食品檢測等領域。目前,適用于pCEC的檢測手段有紫外和質(zhì)譜等,但缺乏一種痕量檢測器,這在一定程度上制約了pCEC的應用。而激光誘導熒光檢測器則以高靈敏度著稱,檢出限可達10-12 mol/L,因此適用于與pCEC聯(lián)用對AFs進行檢測。
雖然AFs在激光激發(fā)下可以產(chǎn)生熒光,但是為了增加AFB1及AFG1的熒光強度,本研究使用了TFA將其氫氧化為AFB2a和AFG2a。
本研究基于pCEC-LIF平臺,優(yōu)化系統(tǒng)參數(shù),將LIF的高靈敏度與pCEC分離相結合。用構建的pCEC-LIF聯(lián)用系統(tǒng)檢測AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,考察聯(lián)用系統(tǒng)的穩(wěn)定性和實用性,為AFs的分離檢測提供了新的解決方案。該方法提高了分析速度、分離效能、檢測的靈敏度,樣品用量只需10-9 L,適用于痕量分析,節(jié)省了檢測成本,具有實用推廣價值。
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