大鼠嗅球切除模型

動物嗅球切除后可出現(xiàn)許多行為學改變，如自發(fā)活動增加、學習記憶功能降低、應(yīng)激反應(yīng)增強、進食和性行為改變等，這些可能與改變了不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能有關(guān)。

(1)復制方法

1)手術(shù)方法  雄性大鼠，體重為250～300g，手術(shù)前至少3～4d每日數(shù)次的撫摸。將大鼠分組，以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/ kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后，剪除頭頸部毛發(fā)，皮膚常規(guī)消毒。固定動物在立體定位儀上，兩耳連線中點縱向?qū)⑵つw切開，暴露顱骨。在冠狀縫和矢狀縫交點向前7mm、旁開2mm處用牙鉆分別鉆兩個2mm直徑的小孔。用探針向下向前破壞嗅球后用真空泵吸出。用止血海綿填充小孔(或用牙托粉水泥封孔)，縫合皮膚，肌肉注射青霉素鈉鹽(每只4萬U連續(xù)注射3d)。每組動物按實驗設(shè)計每天分別給予待測藥物或生理鹽水。術(shù)后14d左右即可進行實驗。

實驗前應(yīng)預先解剖1～2只動物觀察并測定鉆孔位置，吸除嗅球時應(yīng)小心不要損傷額葉皮層。實驗結(jié)束后應(yīng)解剖去嗅球動物以證實是否摘除嗅球。

2)測試方法

①被動回避實驗

跳臺被動回避  電擊箱(30cm×30cm×28cm)底部為金屬柵條可通電，箱內(nèi)有一跳臺(7cm×30cm×4.5cm)。將大鼠先置于電擊箱內(nèi)(不予電擊)使之熟悉環(huán)境1min，然后將大鼠放在平臺上，一旦大鼠觸及金屬柵條就遭遇0.6mA的電刺激，直到大鼠在平臺上連續(xù)呆上3min或遭遇10次電擊為止。記錄至此時大鼠遭電擊的總次數(shù)。

大鼠嗅球切除后遭受電擊的次數(shù)明顯增多，反映了嗅球切除可引起被動回避反應(yīng)的欠缺。給予抗抑郁藥后，可減少動物遭電擊的次數(shù)。

避暗被動回避實驗箱由明暗兩室組成，兩室底部為不銹鋼柵條，條間距離為1cm。兩室的隔板底部中央有一通道(7cm×7cm)供大鼠出入。暗室的不銹鋼柵條與電刺激儀相聯(lián)，如果大鼠進入暗室，則遭遇電擊。將大鼠先放入暗室，并給予一次電擊，大鼠將逃至明室，當大鼠重新進入暗室時，將再次受到電擊，此時記錄為1次，直到大鼠在明室連續(xù)呆上2min遭受電擊達20次，記錄此時大鼠遭受電擊的總次數(shù)。

②主動回避實驗  實驗箱內(nèi)設(shè)有條件刺激裝置，為光刺激(實驗箱兩長側(cè)壁的底部裝有紅外光電管)；底部為不銹鋼柵條，與電擊裝置相連，為非條件刺激(電擊刺激)。實驗包括60個試行周期，每個周期分為條件刺激期、非條件刺激期及間歇期。如果大鼠在條件刺激期移動并切斷兩端的光束，則可避免電擊，記錄為“回避反應(yīng)”。如果在非條件刺激期切斷光束，則電擊立即終止，記錄為“逃避反應(yīng)”。如果切斷光束發(fā)生于間歇期，則記錄為“自發(fā)反應(yīng)”。

大鼠嗅球切除后，回避反應(yīng)次數(shù)明顯增多，逃避失敗次數(shù)顯著降低，表明嗅球切除后主動回避反應(yīng)能力增強。當給予抗抑郁藥后，主動回避反應(yīng)能力遭破壞。

(2)模型特點與比較醫(yī)學  由于嗅球與邊緣系統(tǒng)功能有關(guān)，影響行為、情緒和內(nèi)分泌，因此大鼠切除雙側(cè)嗅球后被動回避學習能力下降、自主活動能力增多、主動回避反應(yīng)能力增強等。這些反應(yīng)部分與嗅球切除后通過改變不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能有關(guān)，抗抑郁藥能特異性地逆轉(zhuǎn)這些行為變化。此模型的抑郁效果明顯、可靠性好，且抑郁動物的病理生理學改變與人類抑郁相似，對檢測抗抑郁劑有較高的選擇價值，常用于抗抑郁藥的次篩以及作用機制的研究。其缺點在于對實驗中手術(shù)技術(shù)的要求高和動物的死亡率較高。術(shù)前術(shù)后的每日撫摸對于減少術(shù)后動物的易怒性及測試時的行為差異很重要。