多年來,酵母菌在生物化學、遺傳和分子分析等方面取得了大量的研究成果,已成為生物制藥研究者的模型生物系統(tǒng)和工具。因此,酵母已成為基因表達研究和重組蛋白的常用載體。盡管研究中使用的酵母種類很多,包括Pichia、Hansen和Debali酵母,但酵母是常用的。
傳統(tǒng)的酶法很難從細胞中提取完整的酵母RNA和細胞內(nèi)蛋白。溶菌酶通常是粗制濫造的,含有RNA酶和蛋白酶,不僅破壞細胞壁,而且破壞靶分子。此外,原生質(zhì)體的酶解通常需要添加洗滌劑,這會導致各種蛋白質(zhì)的失活。因此,機械裂解或破壞酵母細胞通常需要釋放小分子。
1、粉碎前的準備:
0.1g細菌(本實驗以0.1g菌體為例);XX鋼珠;研磨機(選用品牌新銳精儀Gd-300);XX研磨罐。
2、磨削加工。
將0.1g細菌與30MLPBS溶液混合,用移液管均勻滴入液氮。收集冷凍的球。頻率調(diào)整到XXHz,振動時間為XXS。取出研磨罐,放入液氮預冷XXS,取出再研磨。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。