優(yōu)缺比一比:
1. 蛋白負(fù)染色試劑盒
缺點(diǎn):需搭配黑底容器以便觀察
優(yōu)點(diǎn):
(1) 特殊原理:負(fù)染原理,染劑只染膠體,不結(jié)合蛋白
(2) 快速染色:染色過(guò)程只需 5 分鐘,不需要醋酸固定
(3) 高靈敏度:超高染色靈敏度 < 1 ng
(4) 實(shí)驗(yàn)相容:染色過(guò)后可進(jìn)行蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)漬或、電泳溶離、質(zhì)譜儀蛋白質(zhì)鑒定與轉(zhuǎn)譯后修飾分析。
(5) 安全可靠:染液不具毒性且可室溫儲(chǔ)存
(6) 方便觀察:肉眼可見(jiàn)影像,不須熒光
2. SYPRO Ruby
優(yōu)點(diǎn):靈敏度高
缺點(diǎn):
(1) 操作過(guò)程需要全程避光
(2) 須長(zhǎng)時(shí)間過(guò)夜染色
(3) 操作過(guò)程需搭配有機(jī)溶劑
(4) 需搭配價(jià)格高昂之熒光掃描機(jī)會(huì) CCD 影像擷取系統(tǒng)取得影像
3. 硝酸銀染色
優(yōu)點(diǎn):
(1) 染色靈敏度高達(dá) 1ng。
(2) 肉眼可立即觀察染色結(jié)果。
缺點(diǎn):
(1) 染色步驟復(fù)雜且耗時(shí),新手較難駕馭,并且無(wú)法重新染色。
(2) 因銀離子難以去除,即使使用改良版的質(zhì)譜儀兼容之硝酸銀染色法搭配后續(xù)質(zhì)譜分析,依舊難以成功分析蛋白樣品。
4. CBR-250 (Coomassie Brilliant Blue R-250)
優(yōu)點(diǎn):容易取得,價(jià)格較低。
缺點(diǎn):
(1) 靈敏度不高,僅 50 ng。
(2) 操作時(shí)間長(zhǎng)達(dá) 2 小時(shí)至隔夜。
(3) 操作過(guò)程需搭配有機(jī)溶劑,長(zhǎng)期使用將對(duì)使用者造成健康風(fēng)險(xiǎn)。
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