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食用油中黃曲霉毒素B1檢測方案

來源:青島普瑞邦生物工程有限公司   2019年03月28日 09:13  

黃曲霉毒素已成為一個困擾食品業(yè)界的廣泛問題。民以食為天,食品安全是關(guān)系到千家萬戶,關(guān)系到食品企業(yè)存亡的關(guān)鍵,食用油中黃曲霉毒素B1含量超標,源自花生原料霉變,可能是花生在種植、運輸及儲存過程中因天氣濕熱發(fā)霉,造成黃曲霉、寄生曲霉等生長繁殖。黃曲霉毒素是一種致癌物質(zhì),其毒性是KCN的10倍,As2O3的68倍。黃曲霉毒素的毒性要在加工溫度超過280℃時才可以破壞,一般的烹飪方法沒辦法去除掉,唯有在源頭杜絕黃曲霉毒素的污染才是解決之道。

對黃曲霉毒素B1的*,在之前的相關(guān)食品衛(wèi)生標準中有明確規(guī)定,其中:玉米、花生仁、花生油中不得超過20ug/kg;大米和其他食用油類不得超過10ug/kg;其他糧食、豆類、發(fā)酵食品不得超過5ug/kg;嬰兒代乳食品不得檢出黃曲霉毒素B1。作為國內(nèi)專業(yè)從事霉菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù)的供應(yīng)商, 2010年泰樂祺科技投資成立了"檢測應(yīng)用實驗室",重點關(guān)注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等問題,以期快速提出解決方案。

泰樂祺科技現(xiàn)針對近期出現(xiàn)的食用植物油中黃曲霉毒素超標問題,提出以下解決方案。

免疫親和柱+KRC光化學柱后衍生法

1. 簡介

Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2濃度,提高檢測的準確性和靈敏度。

2. 免疫親和柱/KRC衍生法特點:

PriboFast 黃曲霉毒素總量(B+G)免疫親和柱{加標回收>90%}

 

· 特異性很強使得樣品凈化效果;

· 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速,提高檢測效率高
l  · HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高檢測靈敏度,實現(xiàn)較低的檢測限 (黃曲霉毒素B1 0.05ppb)。
l  · 衍生化操作方便,光化學衍生化無需使用衍生試劑(通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)。

· 回收率高,達到90%以上。

 

3. 免疫親和柱法操作步驟簡介:

1) 樣品處理(植物油脂

· 準確稱取試樣25.0 g 于250mL具塞錐形瓶中

· 加人5g 氯化鈉及加入甲醇/水,以均質(zhì)器高速攪拌提取2min;

· 定量濾紙過濾,并準確移取15 M l濾液并加入30mL水稀釋混勻;

· 用玻璃纖維濾紙過濾1-2次,至濾液澄清,備用。

2)將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進行過柱凈化:經(jīng)過Pribofast黃曲霉毒素B1免疫親和柱(IAC-011-3)活化、淋洗、洗脫三步驟,洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測;

3)測定:HPLC直接進樣,經(jīng)黃曲霉毒素色譜柱、KRC光化學柱后衍生化后熒光檢測器直接記錄黃曲霉毒素B1濃度;

 

Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)(符合GB23212-2008)

 

Pribofast KRC-25 柱后光化學衍生器     波長:254 nm
HPLC-色譜柱 :黃曲霉毒素色譜柱150 x 4.6 mm; C-18
流動相: 甲醇/水  (45/ 55  v/v)
流量:1.0 mL/min                 柱溫: 30 °C
進樣體積:  20μL
熒光檢測器: λ-激發(fā)波長: 365 nm        λ-發(fā)射波長: 440 nm

液相色譜儀檢測配置

液相色譜儀帶有熒光檢測器

Pribofast KRC-25 柱后光化學衍生裝置,含有1ml反應(yīng)池,納米燈管254nm

黃曲霉毒素色譜柱 C18 150 x 4.6 mm

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