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植物木質(zhì)素(Lignin)分光光度法試劑盒

來源:上海雅吉生物科技有限公司   2019年04月02日 08:09  

                                                                 規(guī)格:100管/96
植物木質(zhì)素(Lignin)分光光度法含量試劑盒說明書
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì),存在于木質(zhì)組織中,主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間,起抗壓作
用。
測定原理
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?;笤?280nm 處有特征吸收峰,280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關。
需自備的儀器和用品
天平、40 目篩,玻璃試管、燒杯、離心機,恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、高氯酸。
植物木質(zhì)素(Lignin)分光光度法試劑盒試劑組成和配制
試劑一:液體 50mL×2 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 50mL×2 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 100mL×2 瓶,4℃保存。
樣品處理
樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩,稱取約 5mg(記為 W)于 10mL 玻璃試管中(務*玻璃試管,不可用 Ep 管)
測定操作表

 空白管測定管
樣本(mg) 5
試劑一(μL)10001000
高氯酸(μL)4040
于 10mL 玻璃試管中,用封口膜密封,充分混勻,80℃水浴 40min,每隔 10min 震
蕩一次,然后自然冷卻
試劑二(μL)10001000
充分混勻
上清(μL)4040
試劑三(μL)1960(參照注意事項四)1960(參照注意事項四)
200ul 于微量石英比色皿或者96孔板,測定 280nm處吸光值 A。分別記為 A 空白管和 A 測定管,ΔA=A 測定管-A 空白管

植物木質(zhì)素(Lignin)分光光度法試劑盒計算公式
用微量石英比色皿計算公式如下:
標準曲線:y = 0.02776x+0.0068,R2 =0.9889
Lignin(mg/g 干重)= (ΔA-0.0068)÷0.02776×V 反總×10 -3 ÷W×T
=0.0735×(ΔA-0.0068) ÷W×T
V 反總:反應總體積:2.04mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:稀釋倍數(shù)
 

96 孔板計算公式如下:

標準曲線:y = 0.01388x+0.0034,R2 =0.9889
Lignin(mg/g 干重)= (ΔA-0.0034)÷0.01388×V 反總×10 -3 ÷W×T
=0.1470×(ΔA-0.0034) ÷W×T
V 反總:反應總體積:2.04mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:稀釋倍數(shù)
注意事項
1. 試劑一有毒性,請操作時做好防護措施,加熱前必須用封口膜密封,以防氣體溢出。
2. 加熱過程中有劇烈反應,震蕩時輕搖,以免壓力過大噴出造成人生傷害。
3. 試劑三具有強刺激性,建議操作過程全部在通風櫥子操作。
4. 取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙?;潭龋噭┤挠昧靠烧{(diào)整,保證吸光值在0.1-0.8之間即可,并在公式中參與計算。
5.乙?;?/span>測定木質(zhì)素含量如受到實驗環(huán)境的影響,可自行制作標準曲線。
植物木質(zhì)素(Lignin)分光光度法試劑盒

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