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單克隆分離深受廣大客戶的好評

來源:Bio-Techne   2019年05月05日 16:33  
    單克隆分離深受廣大客戶的好評  
    單克隆分離采用的是集流式細胞術(shù)和微流控技術(shù)于一體的新一代細胞分離技術(shù)。流式細胞儀的流體聚焦技術(shù)能夠極大地提高檢測靈敏度,另外微流控技術(shù)使得設(shè)備內(nèi)部的鞘液壓力可以降至2psi以下,也無需高頻振蕩,減少了分選過程對細胞的傷害,大大提高了分選出來的細胞的活性,適用脆弱細胞的分離。另外,一次性芯片真正實現(xiàn)了細胞分選過程中,樣本之間的*隔離(從加樣到分離全都在芯片中完成)。
    “單克隆分離頭”利用聚丙稀導(dǎo)入頭細長柔韌無斷裂且導(dǎo)通的特性,將試劑、糊劑等材料直接送入細長多彎深孔處,有通過此分離頭將細胞分離,進行克隆培養(yǎng)。應(yīng)用于醫(yī)療、環(huán)保、生化、測試等領(lǐng)域。
    離子交換是溫和條件下分離蛋白質(zhì)混合物的一個有用的技術(shù),常見的是應(yīng)用增加鹽濃度的緩梯度溶液進行洗脫。pH梯度洗脫使用頻率較低(除專屬應(yīng)用外,例如色譜聚焦),并且需要復(fù)雜的緩沖液體系。盡管如此,單克隆分離能夠利用常規(guī)緩沖鹽實現(xiàn)pH梯度洗脫,在分離單克隆抗體帶電異構(gòu)體時的優(yōu)勢。
    單克隆分離方法:
    a、在培養(yǎng)皿中制備飼養(yǎng)細胞(小鼠腹腔細胞)單層。
    b、臨用前將2.0%瓊脂糖生理鹽水溶液與等量雙倍濃度的HT培養(yǎng)液混勻,配成1%瓊脂糖培養(yǎng)液,45℃水浴中溫育。
    c、吸去平皿上層培養(yǎng)液,加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液3ml,室溫10分鐘。
    d、取雜交瘤細胞懸液1ml,加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液1ml混勻,鋪于上層。
    e、37℃、7.5%濕潤培養(yǎng)7-14天;克隆生長至2mm時,用毛細吸管吸出克隆,直接轉(zhuǎn)種于含有飼養(yǎng)細胞的24孔板,擴大培養(yǎng)。
    f、吸取上清,檢測抗體,陽性孔可繼續(xù)克隆化,或擴大培養(yǎng)、凍存。
 

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