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單細(xì)胞挑選的使用范圍越來(lái)越廣闊

來(lái)源:Bio-Techne   2019年05月06日 11:14  
   單細(xì)胞挑選的使用范圍越來(lái)越廣闊 
   單細(xì)胞挑選顯微操作法是通過(guò)鏡檢,對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行人工挑選的方法,在制備好適宜濃度的細(xì)胞懸浮液后,可置于顯微鏡下觀察,利用口吸管(可由玻璃毛細(xì)管拉制而成)將目標(biāo)細(xì)胞吸取出來(lái)。條件允許的話,還可使用顯微操作儀,該儀器對(duì)口吸管、注射儀、毛細(xì)針有一定的固定、調(diào)節(jié)功能,可在一定程度上增加操作的通量以及穩(wěn)定性。
   如果對(duì)通量要求較高,同時(shí)目標(biāo)細(xì)胞有適宜的熒光標(biāo)記,可利用流式細(xì)胞儀完成單細(xì)胞挑選。經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液,被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi),在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細(xì)胞被排成單列,以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。單細(xì)胞挑選通過(guò)相應(yīng)熒光檢測(cè)及充電,獲得目的細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞分離。進(jìn)行免疫方面的研究時(shí),流式細(xì)胞為分離單細(xì)胞方法的選擇。
   單細(xì)胞挑選利用非均勻電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞施力,并結(jié)合形態(tài)學(xué)的信息,實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞的捕獲、操控和回收。整個(gè)過(guò)程無(wú)物理接觸或摩擦,保持了細(xì)胞活性,這樣獲得的細(xì)胞可以繼續(xù)培養(yǎng)或者應(yīng)用于表達(dá)譜、測(cè)序、拷貝數(shù)變異等分析。單細(xì)胞挑選系統(tǒng)可分析包含一個(gè)至數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞的樣品,與各種細(xì)胞懸液兼容,也能處理細(xì)針穿刺和組織活檢樣本。
   單細(xì)胞挑選雖不能觀察圖像,卻強(qiáng)調(diào)了整個(gè)過(guò)程的自動(dòng)化,它可以同時(shí)捕獲96個(gè)的細(xì)胞,在同一張芯片上完成細(xì)胞捕獲、裂解、逆轉(zhuǎn)錄及預(yù)擴(kuò)增的全過(guò)程,整個(gè)過(guò)程無(wú)需任何手動(dòng)的溶劑混合及樣品轉(zhuǎn)移操作。單細(xì)胞挑選利用非均勻電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞施力,并結(jié)合形態(tài)學(xué)的信息,實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞的捕獲、操控和回收。整個(gè)過(guò)程無(wú)物理接觸或摩擦,保持了細(xì)胞活性,這樣獲得的細(xì)胞可以繼續(xù)培養(yǎng)或者應(yīng)用于表達(dá)譜、測(cè)序、拷貝數(shù)變異等分析。
   單細(xì)胞挑選雖不能觀察圖像,卻強(qiáng)調(diào)了整個(gè)過(guò)程的自動(dòng)化,它可以同時(shí)捕獲96個(gè)的細(xì)胞,在同一張芯片上完成細(xì)胞捕獲、裂解、逆轉(zhuǎn)錄及預(yù)擴(kuò)增的全過(guò)程,整個(gè)過(guò)程無(wú)需任何手動(dòng)的溶劑混合及樣品轉(zhuǎn)移操作。

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