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常有ELISA操作者抱怨試驗(yàn)復(fù)雜，而經(jīng)驗(yàn)豐富的老師們會(huì)覺(jué)得很簡(jiǎn)便，一是熟能生巧，二是把握了其間的隱秘。
ELISA隱秘要點(diǎn)之加樣：
在ELISA試劑盒中除了包被外，一般需進(jìn)行45加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的性，此刻應(yīng)該運(yùn)用相同口徑的滴管，保持的加樣姿勢(shì)，使每滴液體的體積根本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底，防止加在孔壁上部，并留意不可出現(xiàn)氣泡。
ELISA隱秘要點(diǎn)之洗刷：
洗刷在ELISA試劑盒過(guò)程中不是反響聚，但卻是決議試驗(yàn)勝敗的關(guān)鍵。洗刷的目的是洗去反響液中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反響過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。洗刷如不*，特別在zui后一次，如有酶結(jié)合物的非特異性吸附，將使空白值升高。別的，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標(biāo)抗體效果而產(chǎn)生攪擾。
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