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液相色譜儀系統(tǒng)是由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
工作原理是儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀的儀器本身是記錄樣品通過檢測器時，吸光度的變化而產(chǎn)生的電信號變化，從而產(chǎn)生色譜譜圖。終的結(jié)果就算要靠后期的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理。下面介紹一下兩種常用的液相色譜儀的兩種數(shù)據(jù)處理方法。
在譜圖處理處理完譜圖，即可制作校正曲線，校正曲線是數(shù)據(jù)處理的重點(diǎn)，是將標(biāo)樣譜圖的信息與數(shù)據(jù)做成一個標(biāo)準(zhǔn)，供處理試樣譜圖使用。校正是通過分析的準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)樣品，來確定計算組分濃度的響應(yīng)因子的過程。
1、外標(biāo)法：外標(biāo)法是指添加一定量的標(biāo)準(zhǔn)品于空白樣品中制成對照樣品，與未知檢測樣品平行進(jìn)行樣品處理并檢測，根據(jù)對照品響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)品的濃度函數(shù)關(guān)系計算出未知檢測樣品中被測組分濃度的定量方法。
2、內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法指的是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被測樣品混合物中，然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積及相對校正因子，按公式計算出被測組分的含量。
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