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液相色譜領(lǐng)域HPLC、UHPLC和UPLC的區(qū)別

來(lái)源:依利特(大連)分析儀器有限公司   2019年07月10日 09:05  
HPLC(High Performance Liquid Chromatography):液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography):色譜理論認(rèn)為提高色譜柱的效能(efficiency)就能增加儀器的解析度(resolution),而運(yùn)用粒徑低于2μm的小顆粒無(wú)疑是增加效能的好方法。但減小固定相的粒度以增加色譜柱效能一直的色譜儀器科學(xué)的瓶頸,因?yàn)樾☆w粒不僅要求系統(tǒng)能承受高于目前極限壓力(比如9000psi),需要更小的系統(tǒng)體積(死體積),并且需要能適應(yīng)可能只有幾秒峰寬的高速檢測(cè)器。UPLC具有超低擴(kuò)散體積(小于15μL)可盡可能發(fā)揮亞2μm色譜柱性能。色譜工作者使用UPLC結(jié)合小顆粒色譜柱可以獲得更好的分離度,靈敏度,更快的分析速度。
 
UHPLC: (Ultra-High Performance Liquid Chromatography):UHPLC的誕生是UPLC 對(duì)色譜分離技術(shù)帶來(lái)的一系列變化之一。UHPLC在制造技術(shù),擴(kuò)散體積和耐受壓力方面進(jìn)行了優(yōu)化,使之能夠匹配2.5~3.5μm顆粒度的柱子,大限度發(fā)揮色譜性能。采用顆粒更小的固相不僅可以實(shí)現(xiàn)更高的分辨率,同時(shí)還能縮短整體分析時(shí)間。

三者的區(qū)別在于:

  HPLC UHPLC UPLC
擴(kuò)散體積 >30μL 15 - 30 µL < 15 µL
色譜柱 3.0-4.6 mm內(nèi)徑3-10 µm顆粒選擇代表:4.6mm內(nèi)徑, 5µm 2.1-4.6 mm內(nèi)徑1.7-5 µm顆粒選擇代表:3.0 mm內(nèi)徑,2-3.5μm 實(shí)心核顆粒色譜柱 1.0-4.6 mm內(nèi)徑1.6-5 µm顆粒選擇代表:2.1 mm內(nèi)徑,亞2μm
高耐壓 <6,000 PSI ≥9,000 PSI ≥15,000 PSI


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