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薄層色譜TLC通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法。即將固定相在玻璃、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層，試樣點(diǎn)在薄層的一端，流動(dòng)相借毛細(xì)作用流經(jīng)固定相,使被分離的物質(zhì)展開。
薄層色譜TLC的常規(guī)使用步驟如下：
1.將薄層色譜TLC板切成方形。良好的尺寸是7厘米x 7厘米，但請(qǐng)確保它首先適合您的溶劑容器。
2.將用于色譜柱的溶劑倒入玻璃容器中。溶劑應(yīng)該是2-3毫米深，這樣斑點(diǎn)不會(huì)浸沒(méi)，確保了樣品不會(huì)溶解到溶劑中并隨著溶劑向上移動(dòng)到TLC板上。
3.使用毛細(xì)管將樣品“點(diǎn)”到左下角的板上。該點(diǎn)應(yīng)距離底部和左側(cè)邊緣約0.5-1厘米，直徑1-2毫米。
4.將薄層色譜TLC板放在容器中。不要移動(dòng)或打擾板或TLC容器，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致溶劑中的波紋和溶劑的不規(guī)則。當(dāng)溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時(shí)，用鑷子小心地從容器中取出板。
5.讓溶劑蒸發(fā)。將板旋轉(zhuǎn)90°，使原始樣品點(diǎn)位于右下角。組分斑點(diǎn)將沿著板的底部形成水平線。
6.將TLC板放回容器中。當(dāng)溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時(shí)，用鑷子小心地從容器中取出板。
7.讓板上的溶劑蒸發(fā)，然后使用UV燈或高錳酸鉀浸漬使板可視化。
8.用鉛筆標(biāo)記所有斑點(diǎn)的位置。從樣品被點(diǎn)樣的角落，通過(guò)樣品點(diǎn)，到對(duì)面的角落畫一條對(duì)角線。在二氧化硅上穩(wěn)定的化合物將出現(xiàn)在對(duì)角線上。如果化合物在二氧化硅上分解，其斑點(diǎn)將低于對(duì)角線。
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