在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細(xì)胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),這一變化早于細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DNA(脫氧核糖核酸)片斷化和細(xì)胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性的增加,PI能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將AnnexinV與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來。
細(xì)胞凋亡是一個(gè)形態(tài)學(xué)概念,對(duì)其形態(tài)的觀察是用凋亡檢測(cè)試劑盒研究凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失.細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個(gè)個(gè)空抱,核搪體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈勻一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時(shí)細(xì)胞膜仍保持完整;然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個(gè)細(xì)胞變成數(shù)個(gè)大小不等的有膜包裹的凋亡小體;后,凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬、消化。在凋亡發(fā)生的全過程中,細(xì)胞膜一直保持完整。同一組織中,不同細(xì)胞發(fā)生凋亡的進(jìn)程并不同步?!?/div>
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