ELISA試劑盒實驗中不可忽視的3個核心原理
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ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。主要有:直接法、雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法、應(yīng)用親和素和生物素系統(tǒng)(ABS)等。
ELISA試劑盒實驗必須遵守以下3個核心原理:
(1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
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