GIBICO DMEM ,10% 胎牛血清，很好養(yǎng)，長(zhǎng)的很快，細(xì)胞形態(tài)：在密度低的時(shí)候，是多邊形，密度大的時(shí)候，偏向于梭形。

1. 細(xì)胞核材料：冷藏保存的人肝細(xì)胞（M/F0095-P），InViteoGro CP 培養(yǎng)基（Z990003）,和InViteoGro HI培養(yǎng)基（Z990012）從試管內(nèi)技術(shù)（Baltimore,MD）獲得。

C2-神經(jīng)酰胺、C2-二氫神經(jīng)酰胺和C6-神經(jīng)酰胺是從Alabaster,AL獲得的?？笻uR抗體是從Santa Cruz,CA 獲得的，β肌動(dòng)蛋白是從Cambridge,MA買(mǎi)來(lái)的。

HRP共軛的抗兔和鼠的IgM來(lái)自Hercules,CA。ECL Western blot 探測(cè)箱來(lái)自GE 醫(yī)療保?。⊿alt Lake City,UT）。FuGENE6轉(zhuǎn)染試劑來(lái)自Roche(Indianapolis,IN)，Maxiprep盒來(lái)自Qiagen(Santa Clarita,CA)。

Pan-caspase 抑制器Zvad-fmk和Caspase抑制器設(shè)備分別購(gòu)買(mǎi)于Axxora(San Diego ,CA)和Calbiochern(La Jolla,CA)。Caspase5分析儀來(lái)自Calbiochern，caspase5cDNA來(lái)自O(shè)riGene(Rockville,MD)。

2.用低氧處理肝細(xì)胞：冷藏的人肝細(xì)胞移出和溶解在InVitroGro CP培養(yǎng)基中。細(xì)胞在CP培養(yǎng)基稀釋到濃度為0.7×106cells/ml。

肝細(xì)胞像膠原一樣涂抹在玻片上，然后放置在37℃、5%CO2的培養(yǎng)器里。經(jīng)過(guò)了一夜的培養(yǎng)，肝細(xì)胞轉(zhuǎn)移到InVitroGro HI 培養(yǎng)基中。

肝細(xì)胞在HI培養(yǎng)基中培養(yǎng)一夜后，玻片放置在一個(gè)缺氧的容器(Billups-Rothenberg)里，充滿了95%的氮?dú)夂?%的二氧化碳，在37℃培養(yǎng)12-72和小時(shí)。

氧氣的濃度用YSI模型55CE溶解的氧探針(YSI,Marion,MA)測(cè)量。用于這些研究中，缺氧的條件是氧氣的濃度在0.09±0.001mg/l。