1、免疫化學(xué)分析方法

利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設(shè)計的黃曲霉毒素的免疫分析方法,也是zui常用的黃曲霉毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法（Radioimmunoassay,RIA）,酶聯(lián)免疫法（Enzyme-linked of Immunosorbent Assay,ELISA）和免疫層析法（Immunoaflinity Column Assay,ICA）.它們均可以對黃曲霉毒素進行定量測定。

（1） 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術(shù)-HPLC法

黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段,用熒光計,紫外燈作為檢測工具的快速分析方法.它克服了TLC和HPLC法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物和在樣品預(yù)處理過程中使用多種有毒,異味的有機溶劑,毒害操作人員和污染環(huán)境的缺點.同時黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快,一個樣品只需10-15min,比傳統(tǒng)方法快幾個小時甚至幾天時間;儀器設(shè)備輕便容易攜帶,自動化程度高 ,操作簡單,直接讀出測試結(jié)果,可以在小型實驗或現(xiàn)場使用.可以進行黃曲霉毒素總量 （B1B2G1G2） 的測定,檢測限可達到1ug/kg,達到黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)*值以下測定范圍為1-300ug/kg。

黃曲霉毒素免疫親和柱-液相色譜法比傳統(tǒng)的HPLC法更加安全,可靠,靈敏度和準(zhǔn)確度高.它采用單克隆抗體免疫技術(shù),可以性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高。

（2） 酶聯(lián)免疫吸附法

原理:將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品（含有抗原）提取液的混合液,競爭培養(yǎng)后,在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物.洗除多余抗體成分,然后加入酶標(biāo)記的抗球蛋白的第二抗體結(jié)合物,與吸附在固體表面的抗原抗體結(jié)合物相結(jié)合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物發(fā)生降解反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì),通過酶標(biāo)檢測儀測出酶底物的降解量,從而推知被測樣品中的抗原量。

（3） 一步式黃曲霉毒素檢測金標(biāo)試紙法

一步式黃曲霉毒素檢測金標(biāo)試紙法是利用單克隆抗體而設(shè)計的固相免疫分析法.由此產(chǎn)生的一步式黃曲霉毒素快速檢測試紙可在5—10分鐘完成對樣品中黃曲霉毒素的定性測定.借助黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)樣品,這種方法能估算黃曲霉毒素的含量,非常適用于現(xiàn)場測試和進行大量樣品的初選。

（4） 微柱篩選法

可以用來半定量測定各種食品中黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2的總量。原理 樣品提取液中的黃曲霉毒素被微柱管風(fēng)硅鎂型吸附層吸附后,在波長365nm紫外光燈下顯示藍紫色熒光環(huán),其熒光強度與黃曲霉毒素在一定的光密度范圍內(nèi)成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附劑層未出現(xiàn)藍紫色熒光,則樣品為陰性（方法靈敏度為5-10ug/kg）.由于在微柱上不能分離黃曲霉毒素B1,B2,G1,G2,所以測得結(jié)果為總的黃曲霉毒素含量。

2、薄層層析法

薄層層析（Thin-Layer Chromatography,TLC）是在黃曲霉毒素研究方面應(yīng)用zui廣的分離技術(shù).自1990年,它被列為AOAC （Association of Official Agricultural Chemists）標(biāo)準(zhǔn)方法,該方法同時具有定性和定量分析黃曲霉毒素的功能。

3、液相色譜法

液相色譜（Liquid Chromatography,LC）與薄層層析在許多方面具有相似性,二者互相補充.通常用TLC進行前期的條件設(shè)定,選擇適宜的分離條件后,再用LC進行黃曲霉毒素的定量測定。