HILIC色譜柱是親水相互作用色譜柱,其保留模式類似于正相,同時(shí)又突破了正相模式的溶劑局限。
分離原理:采用反相流動(dòng)相體系,而按照正相順序出峰。通過(guò)親水性相互作用,可有效的HILIC色譜柱中因保留能力弱而難分離的強(qiáng)極性化合物。
常見的可分離的樣品:糖類,人參皂苷,多肽等在C18柱上保留較差的樣品。
HILIC色譜柱與C18柱的比較
親水相互作用色譜屬于正相色譜。它與反相色譜有著相反的作用方式:親水性低(疏水性強(qiáng))的化合物將會(huì)先被溶出。使用C18柱分析親水性化合物時(shí),一般都要使用離子對(duì)試劑。而由于HILIC不需使用任何離子對(duì)試劑,所以由離子對(duì)試劑引起的平衡時(shí)間長(zhǎng),色譜柱劣化加快,流動(dòng)相調(diào)制復(fù)雜等諸多問(wèn)題都將不復(fù)存在。另外,HILIC的固定相三唑基具有陰離子交換作用,此作用對(duì)酸性化合物有較強(qiáng)的保留能力。
HILIC色譜柱的保存方法
使用之后,應(yīng)使用體積比為7:3的乙腈和水進(jìn)行沖洗,清除掉所有的緩沖鹽。
然后,使用100%的異丙醇、以更低的流速進(jìn)行沖洗,以便貯存。應(yīng)往回?cái)Q緊色譜柱端蓋(擰緊色譜柱端蓋),并將色譜柱放回盒內(nèi)。
每次分析運(yùn)行之后,除非第二天要使用,否則建議采用密閉法(按長(zhǎng)期保存的方法)清洗色譜柱,然后用異丙醇沖洗。
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