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戴安離子色譜針對(duì)巴膽堿注射液含量及有關(guān)物質(zhì)測(cè)定

來源:上海斯邁歐分析儀器有限公司   2019年08月26日 21:22  

關(guān)鍵詞:離子色譜;電導(dǎo);IonPac CS17;卡巴膽堿注射液;含量測(cè)定;有 關(guān)物質(zhì) 

 

引言 
卡巴膽堿為M、N膽堿受體激動(dòng)藥,是人工合成的擬膽堿藥,具有雙重縮 瞳作用,可直接作用瞳孔括約肌上的膽堿受體,即刻產(chǎn)生縮瞳效果; 同時(shí)有抗 膽堿酯酶作用,能維持長(zhǎng)時(shí)間的縮瞳效果。 [1]
卡巴膽堿注射液為中國藥典收載品種,目前使用的含量測(cè)定方法為紫外 分光光度法,該方法需對(duì)卡巴膽堿衍生后才能測(cè)定,操作繁瑣,易引入誤 差。[2]本實(shí)驗(yàn)使用離子色譜法對(duì)卡巴膽堿進(jìn)行測(cè)定,靈敏度高,重現(xiàn)性好,且 該色譜條件可同時(shí)分離測(cè)定卡巴膽堿注射液中含有的雜質(zhì)膽堿和乙酰膽堿。

 

 

測(cè)試條件
儀器:戴安ICS 5000離子色譜系統(tǒng); 分析柱:IonPac CS17,7.0 µm,250×4 mm (P/N: 060557); 保護(hù)柱:IonPac CG17,7.0 µm,50×4 mm  (P/N: 060560); 柱溫:30 ℃; 淋洗液:5 mmol/L甲烷磺酸(MSA) 流速:1.00 mL/min; 定量環(huán):20 µL 抑制器:CSRS 300 4 mm,自循環(huán)模式抑制

 

檢測(cè)方式:抑制型電導(dǎo)檢測(cè),陽離子自動(dòng)電解連續(xù)再 生微膜抑制器CSRS 300 4 mm(P/N: 064556),自循環(huán) 模式,抑制電流15 mA。

樣品前處理
取注射液直接進(jìn)樣。

 

 

結(jié)果和討論
重現(xiàn)性、線性和靈敏度
取含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽堿和乙酰膽堿分別 為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,峰面積、保留時(shí) 間、峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均低于3%。結(jié)果見 表1。
在本色譜條件下配制適宜濃度范圍的離子標(biāo)準(zhǔn)曲線, 卡巴膽堿在20~200 mg/L范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系,其線 性相關(guān)系數(shù)r=0.9999;膽堿在2~20 mg/L范圍內(nèi)具有良好 的線性關(guān)系,其線性相關(guān)系數(shù)分別為r=0.9999;氯化膽堿 在2~20 mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,其線性相關(guān)系 數(shù)分別為r=0.9999。在本實(shí)驗(yàn)條件下,氯化膽堿的檢出限 為5.6 µg/L,卡巴膽堿的檢出限為9.7 µg/L,乙酰膽堿的檢 出限為14.0 µg/L。

 

 

實(shí)際樣品分析及加標(biāo)回收
取注射液10 mL,加入含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽 堿和乙酰膽堿分別為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,混合,進(jìn)行加 標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),三種離子加標(biāo)回收率均在90~101%之間。 色譜圖如圖1所示。

 

 

結(jié)論
三種膽堿類化合物在本實(shí)驗(yàn)條件下,可以被很好的 分離和測(cè)定。此方法不需衍生,操作簡(jiǎn)單,且方法有很 好的特異性和重現(xiàn)性,結(jié)果可靠,可用于卡巴膽堿注射 液含量與有關(guān)物質(zhì)的同時(shí)檢測(cè)。

 

 

 

 

 

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