生物實(shí)驗(yàn)中的封閉劑
流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)總結(jié):內(nèi)容包括流式細(xì)胞儀 流程、原理、各種類型的樣本操作、樣本準(zhǔn)備,以同型對(duì)照的理解,及不同情況下如何使用封閉劑等。是本人相當(dāng)一段時(shí)間來的收集以及修正的內(nèi)容。
流式細(xì)胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學(xué)、激光、計(jì)算機(jī)等高技術(shù)發(fā)展起來的一種先進(jìn)儀器,已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué) 、生物化學(xué)、生物學(xué)、腫瘤學(xué)以及血液學(xué)等方面的研究和臨床常規(guī)工作。其中檢測(cè)人白細(xì)胞表面標(biāo)志可對(duì)白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對(duì)淋巴細(xì)胞群和亞群進(jìn)行分類,還能分離純化某一群或亞群細(xì)胞?;罴?xì)胞免疫熒光技術(shù)是用于FCM檢測(cè)的標(biāo)本準(zhǔn)備,染色后也能在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察,在某些實(shí)驗(yàn)條件下,活細(xì)胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優(yōu)于滴片固定的常規(guī)間接免疫熒光的結(jié)果。
(一) 原理
活細(xì)胞表面保留有較完整的抗原 或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合,再用熒光標(biāo)記的第二抗體結(jié)合,根據(jù)所測(cè)定的熒光強(qiáng)度和陽性百分率即可知相應(yīng)抗原的密度和分布。
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