關于顯色AB加入的順序本人還是應該有比較大的關系的!那么顯色液中A是過氧化氫 顯色液是TMB 一般都是這兩種,那么應該怎么去理解呢說明書說先加A再加B ,其實得根據(jù)HRP跟TMB跟H2O2的反應:HRP+H2O2+DH2(色原底物其實就是TMB)==2H20+藍色陽離子根 +終止液(硫酸)==黃色聯(lián)苯坤
HRP催化H202產(chǎn)生氧,然后與TMB反應,所以這里如果A先加進去跟HRP充分反應的話然后再加入TMB讓氧離子跟TMB充分反應,可能顯色的結果會好一點!
由于TMB這種色原底物反應后如果終止液中混有還原劑的話,可以產(chǎn)生逆反應導致藍色褪色!但是這種情況應該不會出現(xiàn)吧!
還有洗板機的問題,如果覺得洗的不干凈,用純水沖一遍!沖的話也是直接往板里倒水!根本就不用考慮什么交叉問題!因為如果隔壁這個陽性標本的血清跑到隔壁去沒經(jīng)過孵育就可以結合的話,那我剛開始還要孵育干嘛,直接加完樣洗掉就可以啦!
后總結建議還是按說明說上的來操作,確保結果。
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