近期有不少客戶來向我們反饋,在按照藥典條件進行丹參中丹參酮類含量測定的過程中,分離度經(jīng)常達(dá)不到要求。月旭科技今天就通過對丹參的測定,一起來尋找分離度達(dá)不到要求的原因,并且解決它!
中國藥典的色譜條件:
色譜柱:月旭Ultimate® Plus-C18,4.6×250mm,5μm。
流動相:
時間min | A:0.02%磷酸溶液(%) | B:乙腈(%) |
0 | 39 | 61 |
6 | 39 | 61 |
20 | 10 | 90 |
20.5 | 39 | 61 |
25 | 39 | 61 |
檢測波長:270nm;
柱溫:20℃;
流速:1.0mL/min;
進樣量:10μL。
在與客戶交流的過程中發(fā)現(xiàn),客戶的所有測定參數(shù)都一樣,只有柱溫有所區(qū)別,客戶使用的柱溫是35℃。那么問題究竟是不是出在了柱溫上呢?
我們今天就用35℃以及20℃兩種柱溫進行測試,來一探問題究竟!
柱溫20℃測試效果
丹參酮IIA對照溶液
供試品溶液
柱溫35℃測試效果
怎么樣?!是不是發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物合并掉了,并沒有分開呢?
所以我們得到的結(jié)論就是:在按照藥典條件進丹參中丹參酮類含量測定的過程中,影響分離度的主要因素是柱溫。在按照藥典中要求的20℃進行測試時,分離度就可以達(dá)到要求。
如果您在日常的實驗中也會遇到類似的問題,包括色譜柱的使用問題,色譜柱的篩選,項目優(yōu)化等等一系列的問題,均可以聯(lián)系我們!我們將全心全意解決您的問題!
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