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探討下國(guó)產(chǎn)液相色譜HPLC的分析基礎(chǔ)
探討下國(guó)產(chǎn)液相色譜HPLC的分析基礎(chǔ)
國(guó)產(chǎn)液相色譜色譜法又稱色譜分析、色譜分析法、層析法，是一種分離和分析方法，在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動(dòng)相固定相中德混合物進(jìn)行洗脫，混合物中不同的物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿固定相移動(dòng)，終達(dá)到分離效果。色譜技術(shù)有分離效率高應(yīng)用范圍廣，分析速度快，樣品用量少而且靈敏度高。在食品分析中應(yīng)用較廣泛的是液相色譜法。液相色譜法在20世紀(jì)70年代末在我國(guó)開(kāi)始應(yīng)用在食品衛(wèi)生領(lǐng)域；20世紀(jì)90年代后期，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中開(kāi)始將HPLC法列為檢測(cè)食品中德?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分、添加劑、有害物質(zhì)等的國(guó)標(biāo)方法。
液相色譜法檢測(cè)（HPLC），是利用經(jīng)高壓泵加壓后的流動(dòng)相帶動(dòng)待測(cè)物各組分通過(guò)色譜柱，因各組分從色譜柱中流出的速度不同，從而實(shí)現(xiàn)不同組分的分離，各組分先后從柱內(nèi)流出后通過(guò)檢測(cè)器的后被轉(zhuǎn)化成電信號(hào)，再由數(shù)據(jù)系統(tǒng)收集處理，終得到色譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，通過(guò)保留時(shí)間進(jìn)行定性分析，也可通過(guò)計(jì)算色譜峰面積和峰高等進(jìn)行定量分析。
HPLC分析技術(shù)的操作條件有：室溫；高壓（液體粘度大，峰展寬?。?。
HPLC分析技術(shù)的分析對(duì)象：
·溶解后能制成溶液的樣品；
·不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制；
·相對(duì)分子質(zhì)量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差及高分子和離子型樣品均可檢測(cè)；
·用途廣泛，占有機(jī)物的80%。
HPLC分析技術(shù)：
·流動(dòng)相與組分間有親合作用力，為提高柱的選擇性、改善分離度增加了因素，對(duì)分離起很大作用；
·流動(dòng)相種類較多，選擇余地廣；
·流動(dòng)相極性和pH值的選擇也對(duì)分離起到重要作用。
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