低溫冷凍離心機(jī)分離效果受離心介質(zhì)溫度和pH的影響
低溫冷凍離心機(jī)分離效果受離心介質(zhì)溫度和pH的影響
低溫冷凍離心機(jī)分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中*的手段。基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中,都離不開(kāi)低溫離心技術(shù),因此低溫冷凍離心機(jī)已成為分子生物學(xué)研究中必需的重要工具。
低溫冷凍離心機(jī)通過(guò)轉(zhuǎn)頭繞軸高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力,根據(jù)不同物質(zhì)在離心場(chǎng)中沉降速度的差異,使樣品中不同性質(zhì)的物質(zhì)分離,以滿足科研人員對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品的分析、分離要求。的分離效果與很多因素有關(guān),不可否認(rèn)離心力和離心時(shí)間這兩個(gè)是非常重要的。一般來(lái)講,離心力越大,則離心效果越好。而在離心時(shí)間上,則是離心時(shí)間越長(zhǎng),離心效果越好。不過(guò),需要知道的是,同等離心力下,當(dāng)離心時(shí)間達(dá)到某些數(shù)值后,離心效果不會(huì)再提升,則是會(huì)保持不變。在實(shí)際操作中,以下條件也至關(guān)重要。
對(duì)于生物樣品,為了防止待分離物質(zhì)的凝集、變性和失活,除了在離心介質(zhì)的選擇方面加以注意外,還必須控制好溫度及介質(zhì)溶液的pH值等離心條件。
離心溫度一般控制在4℃左右,對(duì)于某些熱穩(wěn)定性較好的生物樣本,離心過(guò)程可在室溫下進(jìn)行。
但由于超速或高速離心時(shí),轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)會(huì)發(fā)熱從而引起溫度升高導(dǎo)致樣本損失。故必須采用冷凍系統(tǒng),使溫度穩(wěn)定在一定范圍內(nèi)。
離心介質(zhì)溶液的pH值應(yīng)處于樣本可以穩(wěn)定存在的pH范圍內(nèi),必要時(shí)可采用緩沖液。
另外,溶液過(guò)酸或過(guò)堿有可能引起轉(zhuǎn)子和離心機(jī)的其他部件的腐蝕,應(yīng)盡量避免與部件直接接觸,并在接觸后及時(shí)清洗。
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