技術(shù)服務(wù)介紹

油紅O對(duì)脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂質(zhì)染色，即油紅O先溶于60%異丙醇中，然后切片浸入油紅O染液中時(shí)，油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高，所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。

細(xì)胞周?chē)阽R下呈現(xiàn)空泡時(shí)，究竟是水樣變性、糖原，還是被溶解的脂肪?就需要用脂質(zhì)染色來(lái)幫助鑒別診斷，如脂肪瘤或脂肪肉瘤，脂肪染色呈陽(yáng)性。腎的透明細(xì)胞癌，在癌細(xì)胞胞質(zhì)透亮，但脂肪染色為陰性。腎上腺皮脂腺瘤質(zhì)染色也為陽(yáng)性。動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)有脂質(zhì)沉著。脂滴顯示紅色，細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。

服務(wù)流程

油紅O染色步驟

固定：將冰凍切片復(fù)溫干燥10min；細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定15min，PBS漂洗3次，5min/次。

染色：入油紅O工作液孵育10-15min；細(xì)胞爬片破膜10-15min，PBS漂洗3次，5min/次，入油紅O工作液37°染色1-2h。

分化：75%酒精分化2s，水洗1min。

復(fù)染細(xì)胞核：Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右，自來(lái)水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來(lái)水沖洗，氨水返藍(lán)，流水沖洗。

封片：用紙巾吸去周邊水分，甘油明膠封片。

染色結(jié)果：脂滴呈橘紅色至鮮紅色，細(xì)胞核藍(lán)色。

客戶(hù)需知

由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑，所以一般用冰凍切片染色來(lái)顯示。

作脂肪染色的冰凍切片不能太薄，過(guò)薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。

蘇木素復(fù)染時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。

染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存，應(yīng)盡快觀察及照相。

整個(gè)操作過(guò)程中注意動(dòng)作宜輕柔，不宜動(dòng)作太大，以免脂肪丟失或移位。

甘油明膠常溫下為凝固狀，用前30min放入60°烘箱或入60°溫水促其成液狀，其封片后易產(chǎn)生氣泡，所以要趁甘油明膠從烘箱中拿出來(lái)后盡快封片。

封片后如有氣泡不能按壓改玻片也不宜強(qiáng)行扯下蓋玻片，玻片可入60-70°溫水中，讓蓋玻片自行脫落，然后重新封片，以防脂肪移位。

實(shí)驗(yàn)周期

本公司常規(guī)實(shí)驗(yàn)周期為15個(gè)工作日。（不含送貨時(shí)間）

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)

歡迎咨詢(xún)創(chuàng)凌生物！