細(xì)胞培養(yǎng)體系一般由以下四種（三種）組成： 名稱 體積 保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500ml 4℃、避光 添加劑 5ml -20℃、避光 胎牛血清（FBS） 0-50ml -20℃、避光 雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S） 5ml -20℃、避光 添加劑和雙抗通常濃度為 100X（100 倍工作濃度）。血清的添加比例有 0%（不添加），1%（5ml）， 2%（10ml），5%（25ml），10%（50ml）幾種。 次使用時(shí)先將-20℃保存的添加劑、雙抗、FBS 轉(zhuǎn)移到 4℃溶解后，在滅菌后的百級(jí)潔凈 等級(jí)環(huán)境中操作，所使用的容器和移液耗材均需要進(jìn)行過無菌處理。 首先將解凍的 FBS、添加劑和雙抗進(jìn)行分裝，平均分裝成 5-10 份，留下本次配制所需要的量， 剩余的繼續(xù)放回-20℃保存，之后按需取用融化后配制*培養(yǎng)基，避免反復(fù)凍融。 建議用無菌的 50ml 離心管盛裝配置好的*培養(yǎng)基。 配制方法：在每個(gè) 50ml 離心管中加入①500ul 添加劑、②500ul 雙抗、③50×血清百分比 ml 的胎牛血清、④（50×（1-血清百分比）-1）ml 的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。配制完成后蓋上蓋子， 顛倒混勻備用。 例如：在血清比例為 5%的條件下，50ml 離心管中各組分的體積分別為： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：（50×（1-5%）-1）=46.5ml+添加劑：500ul +雙抗：500ul+血清：50×5%=2.5ml 配置好的培養(yǎng)基置于 4℃避光保存。由于添加劑中有很多重組蛋白，易發(fā)生降解，故配置好 的*培養(yǎng)基有效期僅為 3-4 周，請(qǐng)盡快使用。因此建議每次配制 1-2 管（50-100ml），當(dāng)然 使用量大的情況下也可以適量增加配置量。 P. S.：不建議客戶將全部的血清、雙抗、添加劑直接加入基礎(chǔ)培養(yǎng)中混勻使用，原因如下： 1.500ml 的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的體積較大，灌裝時(shí)體積波動(dòng)很大，直接加入，無法準(zhǔn)確地控制因子 和血清的工作濃度。 2. 配制好的培養(yǎng)基僅能在 4℃保存 3-4 周，如果期間沒用完，繼續(xù)使用會(huì)影響培養(yǎng)效果。 如果是-20℃保存，可以延長(zhǎng)保存時(shí)間，但是反復(fù)凍融也會(huì)影響*培養(yǎng)基的效果。 3. 如果使用培養(yǎng)基時(shí)由于操作失誤導(dǎo)致污染，分裝能減少培養(yǎng)基的損失量。