收獲糧食和庫存糧食的真菌毒素的檢測,往往批量大,時間緊,實驗室一般用酶聯(lián)免疫(ELISA)試劑盒進(jìn)行篩選,由于市供ELISA試劑盒品牌比較多,前處理方法和操作方法也不盡相同,不同的試劑盒存在著測定結(jié)果方面的偏差。

真菌毒素ELISA試劑盒進(jìn)行測試,研究分析試劑盒測試結(jié)果的穩(wěn)定性、精密度和準(zhǔn)確度,來選擇試劑盒的應(yīng)用；研究建立了新的ELISA檢測方法的樣品前處理*參數(shù),驗證了ELISA方法用于谷物中AFB1分析的可行性,并用HPLC重點驗證了測試盒的靈敏度、線性關(guān)系、檢測重復(fù)性、加標(biāo)回收率等指標(biāo)；
結(jié)果表明,對ELISA測定結(jié)果影響zui顯著的是甲醇濃度,其次是提取溶液體積、提取時間以及提取溫度。建立了新的ELISA法測定玉米中AFB1的前處理條件參數(shù)為：60目細(xì)度,7倍的75%甲醇溶液升溫到30℃時,振蕩45min提取。用高效液相法重點驗證了酶免測試盒時,HPLC法測定AFB1標(biāo)準(zhǔn)曲線為在200μg/mL到0.2μg/mL濃度的稀釋過程*不產(chǎn)生偏差,線性相關(guān)系數(shù)為1.0000。在添加濃度為0.1～20ug/kg時,HPLC法加標(biāo)回收率為68%-88%,ELISA法的加標(biāo)回收率為60%-108%,用ELISA法測定時線性系數(shù)為0.9978,靈敏度為0.0497 ug/L, ELISA法測定玉米中AFB1與HPLC法測定時的回收率相當(dāng)。

黃曲霉毒素主要是由黃曲霉菌和寄生曲霉菌等多種真菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物,廣泛存在于糧食谷物和加工食品中,在眾多霉菌毒素中,黃曲霉毒素B1(AFB1)毒性大,致癌力強,理化性質(zhì)穩(wěn)定,對人類健康的危害性極大。