小鼠γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒試驗過程：

1． 別離設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其他各步操作相同）、規(guī)范品孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上規(guī)范品孔中參加規(guī)范品50μl；在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。人熱休克蛋白90（HSP-90）每孔參加酶標(biāo)試劑50μl，空白孔在外。悄悄晃動混勻，37℃溫育60分鐘。

2． 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振動30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次，拍干。

3.人熱休克蛋白90（HSP-90）每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

4.取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。

5.人熱休克蛋白90（HSP-90）測定：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

6.根據(jù)規(guī)范品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出規(guī)范曲線的直線回歸方程，人熱休克蛋白90（HSP-90）再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的，其實踐濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。