單細胞鋪板的三種手法

來源：Bio-Techne 2020年02月14日 16:36

單細胞鋪板手法一：均勻單層。要鋪成那種很均勻的單層細胞，手法如下：

1，細胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min。

2，在滴入細胞時，細胞板子與通風櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。

3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。

4，置于水平臺上，放置10-20分鐘

5，放入孵箱。在細胞鋪板時，每一種板子的孔面積有多大，培養(yǎng)的液體量以及加入細胞量。

手法二：中間少，周圍多。其實細胞鋪板不一定都需要單個單個的那么均勻，比如，做免疫熒光時，學霸姐姐喜歡鋪中間少，周圍稍多的板子，因為這個樣子可以同時檢測到單個細胞的形態(tài)，另外又可以照一點低倍的用作于統(tǒng)計，所有的細胞都在一個環(huán)境中。

要鋪這樣的細胞樣子，那鋪細胞時要注意手法了：

1，細胞板子不需要提前用培養(yǎng)基潤洗，直接從邊上滴入混有細胞的培養(yǎng)基。

2，放置30s-1min后，前后搖晃5-8次。

3，放在水平臺上靜置2-5min。

4，放入孵箱。

其實在單細胞鋪板的時候，你要準確的知道你所養(yǎng)的細胞的特性，比如：

1，細胞的名稱，來源。2，細胞的屬性。3，細胞分裂時間。

細胞鋪板后，細胞狀態(tài)不好怎么辦？

如果出現(xiàn)這種情況，學霸姐姐建議你從以下幾個方面考慮一下原因：

1，用來鋪板的細胞狀態(tài)本身就不好。2，用來鋪板的細胞傳代次數(shù)太多，有些老化。3，胰酶消化時間過長。4，中和的血清量及時間不夠。5，支原體污染。

細胞鋪板是一個經(jīng)驗積累的過程，你的手法也需要積極的改進，不要生搬硬套，也不要一味追求的鋪均勻，在實驗過程中多思考細胞本身的特征和屬性，出現(xiàn)問題積極解決即可。

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