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血清實(shí)驗(yàn)遇到這些問題應(yīng)淡定

來源:研域生物技術(shù)(上海)有限公司   2020年03月02日 10:52  

當(dāng)實(shí)驗(yàn)新手使用血清時(shí)遇到這些問題應(yīng)“淡定”處理:

1. 怎樣去除沉淀物?

技術(shù)解答:若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。

我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。

2. 我的FBS部分解凍,該怎么辦?

技術(shù)解答:讓血清*解凍,輕輕旋轉(zhuǎn)血清瓶, 然后重新冷凍血清。血清質(zhì)量不會(huì)受到影響。

3. 怎樣熱滅活血清?

技術(shù)解答:血清熱滅活是在水浴56度,保持30分鐘, 水位應(yīng)該高于血清水位。在熱滅活過程中,溫度的調(diào)節(jié),通過監(jiān)控含同樣體積的水的參照瓶里的水溫進(jìn)行調(diào)節(jié)。在熱滅活過程必須旋轉(zhuǎn)瓶子每5 分鐘混合一次,確保受熱均勻。使用的溫度計(jì)必須經(jīng)過校準(zhǔn)!

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁,污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化。

那么黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能是因?yàn)椋?/strong>

1、配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng)。

2、血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果。

3、培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。

4、細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘骸。

5、配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn)。

好的血清才能讓實(shí)驗(yàn)更加成功,結(jié)果更加,所以選擇一個(gè)好的血清對(duì)您的實(shí)驗(yàn)來說是非常有必要的。

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