氨基柱是一款既可以正相使用，也可以反相使用，但是我們要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱出廠時(shí)保存在正相環(huán)境中。

01

用于正相的體系：

1.1 推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積，后換成你實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相。

1.2 正相使用時(shí)，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析；流動(dòng)相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物。

1.3 任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。

02

用于反相的體系：
2.1 由于新的氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，與反相流動(dòng)相是不互溶的，因此如果使用反相的方法，必須用至少10倍柱體積的異丙醇沖洗過(guò)渡（約2h，0.5mL/min），以除去正相保存溶液。過(guò)渡過(guò)程中注意因異丙醇粘度較大，會(huì)導(dǎo)致柱壓很高，適當(dāng)調(diào)低流速即可。

2.2 再用至少10倍柱體積95％水-5％乙腈（或甲醇）沖洗（不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去）過(guò)渡，后用流動(dòng)相平衡。

2.3 用完后洗柱時(shí)，必須先用95％水沖洗至少10倍柱體積，除去所用緩沖鹽（不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去）。然后保存于乙腈/水（80：20）溶液（一個(gè)月內(nèi)）中。長(zhǎng)期不用的話，建議用異丙醇保存（一個(gè)月以上）。

2.4 新柱子一定要置換掉保存溶液，用異丙醇保存的柱子在使用前也需要花一定的時(shí)間給置換掉。

2.5 反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制pH值范圍（根據(jù)你色譜柱耐受使用pH），pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。

2.6 還有一種情況是，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí)，酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。---------建議用10-15倍的柱體積的為pH=11 NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。

2.7 柱子再生：以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH10.0的氨水或氫氧化鈉水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過(guò)11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再乙腈/水（80：20）溶液沖洗保存。