什么是實時定量pcr儀?這就告訴你
做定量PCR的目的是為了了解起始模板數(shù)的量,這個一下寫不清楚,你看一個說明書看得懂.而反轉(zhuǎn)錄PCR就是把mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,簡寫也是RT-PCR.不過和上面的不同!這個RT是reverse transcript的縮寫!其實啊,對于做表達量的實驗而言,反轉(zhuǎn)錄PCR是熒光定量PCR的di一步,很多人是這么來描述的:RT-qPCR.這個RT就是反轉(zhuǎn)錄,這個q是量.
在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發(fā)和采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,實時定量pcr儀使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng),得出量化的實時結(jié)果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道;有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產(chǎn)物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實現(xiàn)一次檢測多種目的基因的功能。
實時定量pcr儀要應用于臨床醫(yī)學檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。
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