血鉛檢測的幾種方法

發(fā)布時(shí)間03年04月23日 10時(shí)27分

　　
    一般認(rèn)為有四種。紅細(xì)胞原卟啉（EP）的測試法、原子吸收光譜法（AAS）、塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）、陽極溶出伏安法（ASV）。

什么是紅細(xì)胞原卟啉（EP）測試法？

    紅細(xì)胞原卟啉（EP）升高可以間接反映出人體血鉛的含量。在正常情況下原卟啉（EP）和鐵在鐵絡(luò)和酶的作用下在紅細(xì)胞內(nèi)結(jié)合生成血紅素。在鉛負(fù)荷增高的情況下鐵絡(luò)和酶受到抑制，原卟啉（EP）在紅細(xì)胞內(nèi)堆積。在紅細(xì)胞中，90%的原卟啉（EP）會以鋅原卟啉（ZPP）形式存在（ZPP）在光照射下會發(fā)射429nm的熒光，用血液熒光測定法即可測得ZPP的含量。

    因?yàn)?span lang="EN-US">EP對光敏感，因此在標(biāo)本送檢過程中應(yīng)注意避光，應(yīng)盡快進(jìn)行測定。同時(shí)EP增高除了見于鉛中毒外，還見于缺鐵性貧血、感染和先天性卟啉代謝異常性疾?。ㄑ巡〉龋┰跍y試首先一定要先排除這些造成EP增高的可能。

    依據(jù)是大量的研究結(jié)果表明：在鉛濃度為10ug/dl~25ug/dl時(shí)，用EP法檢測，其診斷的靈敏度和精度都是非常低的。而這一血鉛水平已明確對兒童健康有害。所以用EP法檢測會造成兒童實(shí)際血鉛水平較高而測量結(jié)果較低，即假陰性現(xiàn)象出現(xiàn)。在美國，1991年發(fā)表的《預(yù)防幼兒鉛中毒》中，CDC已明確表示不能再用EP測試法來進(jìn)行兒童鉛含量的普查。

什么是原子吸收光譜法（AAS）？

    原子吸收光譜法是一種常規(guī)的元素分析法 ，可以用來分析常規(guī)樣品中鉛含量。它是基于鉛所產(chǎn)生的原子蒸汽對特征譜線的吸收作用來進(jìn)行定量分析。首先將試液噴射成霧狀進(jìn)入燃燒火焰中，含鉛鹽的霧滴在火焰溫度下?lián)]發(fā)并離解成鉛原子蒸汽，在用鉛空心陰極燈作光源，它輻射出283.3nm的鉛特征譜線的光，當(dāng)通過一定厚度的鉛原子蒸汽時(shí)，部分光被蒸汽中基態(tài)的原子吸收而減弱。通過單色器和檢測器測得鉛特征譜線被減弱的程度，即可求得試樣中鉛的含量。

    對于用火焰原子吸收法做人體血鉛含量分析，無論是用甲基異丁酮萃取血鉛抑或是用螯合劑，它是一種舊的技術(shù)，由于對人體產(chǎn)生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發(fā)且電離電位較低的元素。使用火焰原子吸收光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達(dá)不到檢測人體血鉛的檢測范圍。并且此方法所需的靜脈血量較多（5~7毫升）。同時(shí)由于在處理血樣的過程中是*暴露在環(huán)境（如灰塵）中和血樣進(jìn)行硝化處理過程中使用國產(chǎn)硝酸本身的鉛含量過高，因此可能造成對血樣的二次污染，會造成兒童實(shí)際血鉛水平較低而測量結(jié)果較高，即假陰性現(xiàn)象出現(xiàn)。

什么是塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）？

    石墨爐原子吸收光譜測定法已被有效的用來測定血液中鉛含量?，F(xiàn)代的原子爐測定儀器是可靠、準(zhǔn)確、高精度和全自動的?，F(xiàn)有的幾家生產(chǎn)商在市場上銷售的原子石墨爐儀器都有測定血鉛含量的功能（可被設(shè)置）。這類儀器要有塞曼效應(yīng)背景修正系統(tǒng)，并保證用于分析鉛的波長穩(wěn)定在283.3nm。 由于對人體產(chǎn)生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發(fā)且電離電位較低的元素，如果使用一般火焰的原子光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達(dá)不到檢測人體血鉛的檢測范圍而使用石墨爐原子吸收光譜可以大大提高鉛的原子化效率，使靈敏度大幅度增加而達(dá)到檢測血鉛的檢測范圍。但石墨爐原子吸收光譜受光散射和分子吸收的影響比火焰原子吸收量大，因此有必要對石墨爐原子吸收光譜進(jìn)行背景校正，一般選擇塞曼效應(yīng)校正背景。所以塞曼效應(yīng)校正背景是通過旋轉(zhuǎn)的檢偏器把空心陰極燈的光分成平行于磁場的偏振光PII和垂直于磁場的偏振光PI，在石墨爐加上11K高斯的*磁場。這時(shí)吸收線便分裂為π、δ+、δ-三個(gè)成分。檢偏器和調(diào)制器一起旋轉(zhuǎn)，使PII和PI以一定頻率交替的通過原子化器。由于吸收線的π成分只吸收PII不吸收PI，故可利用PII測出原子吸收和背景吸收，PI不被π、δ+、δ-吸收，可以利用PI來測定背景吸收，兩組吸收訊號經(jīng)電子系統(tǒng)處理（減法），既得到真實(shí)的原子吸收訊號，達(dá)到校正背景的目的。

    同時(shí)，在使用塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜來測定血鉛時(shí)，要注意以下幾個(gè)方面的問題：

    1、在采血后對血樣進(jìn)行硝化處理過程中，由于此過程血樣是*暴露在環(huán)境（如灰塵）中，因此一定注意環(huán)境中的鉛污染血樣。

    2、在采血后對血樣進(jìn)行硝化，硝化的作用是去除血液里的纖維素，使鉛以游離態(tài)的形式存在于溶液中，處理過程中有時(shí)使用國產(chǎn)硝酸本身的鉛含量就很高，甚至?xí)哂谘獦拥你U含量，因此有必要在使用硝酸對血樣進(jìn)行硝化處理前先檢測硝酸的鉛含量并采取措施降低硝酸的鉛的含量，避免血樣的二次污染。

    3 、在使用塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜來測定血鉛時(shí)必須要有專業(yè)技術(shù)人員來完成此操作過程。

什么是陽極溶出伏？ 安法 （ASV）

    陽極溶出伏安法 （ASV）是測量各種間質(zhì)中多種金屬的一種電化學(xué)分析方法，它被用來測定血鉛的濃度已有25年多的歷史。雖然此技術(shù)比較直接，而且儀器也不貴，但此技術(shù)方法在分析時(shí)所要求使用的每個(gè)試劑的價(jià)格卻比石墨爐原子吸收法所用試劑價(jià)格要高，用陽極溶出伏安法的儀器體積很小，比石墨爐原子吸收法所用設(shè)備占用的空間也小，并且也不要求別的特殊輔助設(shè)備。這種分析方法的原理是要求鉛必須從其復(fù)合物中分離出來，并且以游離態(tài)Pb2+離子存在，在鍍汞的石墨電極上加負(fù)的電勢使游離Pb2+被電鍍在鍍汞的石墨碳電極表層。再在一個(gè)特定的電壓值上，鉛離子又會從電極上溶出，在此過程中將產(chǎn)生一定的電流，而此電流值正好與血樣中鉛濃度的大小成比例。