糖類物質(zhì)分析利器—離子色譜值得擁有！

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高立紅 韓春霞 鄭洪國

糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機(jī)化合物，在生命活動過程中起著重要作用。由于其具有改善腸道菌群，以及抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖降血脂等作用，廣泛應(yīng)用于食品和醫(yī)藥領(lǐng)域。因此，糖類物質(zhì)的分析檢測在食品和藥物質(zhì)量控制方面具有重要作用。

糖類分析難點：

1. 極性強(qiáng)并且同分異構(gòu)體較多，常規(guī)色譜柱對其保留和分離效果欠佳；

2. 無紫外吸收或較弱，一般檢測器無法直接檢測， 需要衍生后進(jìn)行測定，操作復(fù)雜并且某些熱不穩(wěn)定的糖回收率差。

基于糖類物質(zhì)的化學(xué)特征，以及常規(guī)分析檢測難點，采用離子色譜法（IC）進(jìn)行檢測具有多種優(yōu)勢：

1.糖分析色譜柱對糖類物質(zhì)具有很好的保留和分離效果；

2.脈沖安培檢測器（PAD）對糖類物質(zhì)具有特異性響應(yīng)和高靈敏度；

3.無需衍生即可直接檢測，重復(fù)性好；

4.單雙糖、低聚糖、多聚糖、糖醇、氨基糖、酸性糖均可進(jìn)行檢測。

Dionex™ ICS-6000多功能高壓離子色譜儀

快來圍觀離子色譜在糖分析中的優(yōu)異表現(xiàn)吧！

單雙糖分析

分離度和靈敏度齊飛——賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀，配置*的單雙糖分析色譜柱，脈沖安培檢測器，使離子色譜輕松應(yīng)對半乳糖、葡萄糖、木糖、果糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖等常見單雙糖的測定。僅需5~25 μL小體積進(jìn)樣即可檢測ng/L~mg/L級別單雙糖，無需衍生化，靈敏度高，選擇性好。

IC-PAD測定常見單雙糖

1-巖藻糖；2-鼠李糖；3-阿拉伯糖；4-半乳糖；5-葡萄糖；6-蔗糖；7-木糖；8-果糖；9-乳糖

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脫水糖和糖醇分析

對PM2.5大氣顆粒物中糖類物質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測可以有效幫助識別大氣顆粒污染物的成因和來源。采用ICS-6000離子色譜儀脈沖安培法測定大氣顆粒物中左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖，無需衍生可直接測定，操作簡單重復(fù)性好；并且與顆粒物中阿拉伯糖醇和海藻糖等干擾物質(zhì)具有有效分離；當(dāng)樣品提取液為10 mL，左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖的檢出限可達(dá)到0.02 μg，靈敏度高。

IC-PAD測定大氣顆粒物中脫水糖和糖醇

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低聚糖和多糖分析

1. 國家標(biāo)準(zhǔn)方法依從

2016年出臺的三項食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)：《GB5009.245-2016食品中聚葡萄糖的測定》、《GB5009.255-2016食品中果聚糖的測定》、《GB5009.258-2016食品中棉子糖的測定》均采用賽默飛離子色譜條件進(jìn)行測定。賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀，配置四元梯度泵和脈沖安培檢測器，四電位波形測定，靈敏度高，重復(fù)性好，助您輕松應(yīng)對標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)。

2.  乳粉中的低聚半乳糖

低聚半乳糖(GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分，因此是奶粉中的必檢項目。賽默飛自主研發(fā)建立使用低聚半乳糖原料為對照品直接測定低聚半乳糖的方法。利用不受奶粉本底干擾的色譜峰來定性定量，不受樣品中高含量乳糖的干擾，可準(zhǔn)確測定嬰幼兒奶粉中的低聚半乳糖。此方法無需酶解，降低成本，但對色譜柱分離能力和檢測器靈敏度要求較高，賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀，配置脈沖安培檢測器和Carbopac PA20色譜柱，可*高靈敏度和分離度的要求。

IC-PAD測定不同廠家的低聚半乳糖譜圖

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3.  淀粉多糖的分析

對于聚糖分析，即使聚合度大于100的淀粉，離子色譜法也仍有很好的分離度和靈敏度，可分離出多達(dá)132個峰！其他檢測方法*！

IC-PAD測定玉米淀粉譜圖

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糖型結(jié)構(gòu)分析

由于賽默飛離子色譜無需衍生、靈敏度高以及糖色譜柱you秀的保留分離能力，其在注射液糖類分析、多糖疫苗/多糖蛋白結(jié)合疫苗和糖基化蛋白藥物分析等方面亦有you秀表現(xiàn)。

糖基化對蛋白藥物的療效，穩(wěn)定性，免疫原性具有重要的影響。糖基化蛋白經(jīng)酶切后，N-糖鏈無需衍生即可直接離子色譜進(jìn)樣分析，避免了衍生過程中唾液酸的降解，減少樣品前處理步驟和時間。2020版中國藥典新增單抗N糖譜分析，采用ICS-6000高壓離子色譜儀，配置脈沖安培檢測器和Carbopac PA200色譜柱進(jìn)行測定。此外，賽默飛*的IC-Q Exactive高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，可鑒定出更多的糖型，適用于復(fù)雜唾液酸修飾的糖型，可極大的完善和推動糖蛋白類藥物N-糖鏈的質(zhì)控分析。

單克隆抗體N-糖鏈 (a) LC-MS/MS完整分析流程, (b) IC-MS分析流程

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IC-PAD和IC-QE檢測N-糖型結(jié)果

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大家總結(jié)了離子色譜法測定糖類物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)方法和推薦色譜柱，誠意滿滿！??！

離子色譜法測定糖類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)方法和推薦色譜柱

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