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毛細管電泳基本原理
毛細管電泳(Capillary Electrophoresis，CE)是八十年代后期在范圍內(nèi)迅速崛起的一種分離分析技術(shù)。具有快速、高效、高靈敏度、易定量、重現(xiàn)性好及自動化等優(yōu)點，已廣泛地應(yīng)用于小分子、小離子、多肽及蛋白質(zhì)的分離分析研究。它又在核酸分離方面顯示出巨大的潛力。電流通過導(dǎo)體時產(chǎn)生焦耳熱。傳統(tǒng)平板凝膠電泳的*大局限性在于其無法克服兩端高電壓帶來的焦耳熱所產(chǎn)生的負面影響。焦耳熱可使篩分介質(zhì)內(nèi)部出現(xiàn)溫度、粘度及分離速度的不均一，影響遷移、降低效率、使區(qū)帶變寬。由于這種負面影響與電場強度成正比，所以極大地限制了高電壓的引入。也難以提高電泳速度。毛細管電泳使樣品在一根極細的柱子中進行分離。細柱可減小電流，使焦耳熱的產(chǎn)生減少;同時又增大了散熱面積，提高散熱效率，大大降低了管中心與管壁間的溫差，減少了柱子徑向上的各種梯度差，保證了高效分離。因此可以加大電場強度，達到100～200V/cm，全面提高分離質(zhì)量。
毛細管電泳的基本裝置是一根充滿電泳緩沖液的毛細管和與毛細管兩端相連的兩個小瓶微量樣品從毛細管的一端通過“壓力”或“電遷移”進入毛細管。電泳時，與高壓電源連接的兩個電極分別浸人毛細管兩端小瓶的緩沖液中。樣品朝與自身所帶電荷極性相反的電極方向泳動。各組分因其分子大小、所帶電荷數(shù)、等電點等性質(zhì)的不同而遷移速率不同，依次移動至毛細管輸出端附近的光檢測器，檢測、記錄吸光度，并在屏幕上以遷移時間為橫坐標，吸光度為縱坐標將各組分以吸收峰的形式動態(tài)直觀地記錄下來。
毛細管電泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛細管電泳(HPCE), 是近年來發(fā)展非?？斓姆治龇椒ㄖ?。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm內(nèi)徑毛細管柱內(nèi)用高電壓進行分離, 創(chuàng)立了現(xiàn)代毛細管電泳。1984年Terabe等建立了膠束毛細管電動力學(xué)色譜。1987年Hjerten 建立了毛細管等電聚焦,Cohen和Karger提出了毛細管凝膠電泳。短短幾年內(nèi),由于CE符合了以生物工程為代表的生命科學(xué)各領(lǐng)域中對多肽、蛋白質(zhì)(包括酶，抗體)、核苷酸乃至脫氧核糖核酸(DNA)的分離分析要求,得到了迅速的發(fā)展。
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