超氧陰離子自由基清除能力測試試劑盒
(A002-96T分光光度計法)
一.測定原理
該方法利用NADH-PMS-NBT為超氧陰離子(O2·-)生成系統(tǒng),超氧陰離子清除劑能減少NBT的藍色。通過檢測560nm處吸光值可判斷體系中還原物質(zhì)的還原能力。
二.試劑組成
試劑一:液體40mL×1瓶;
試劑二:液體1mL一瓶;
試劑三:粉劑一支;
試劑四:粉劑一支;
試劑五:1mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,1mL。
三.儲存條件及有效期
試劑盒-20℃可保存6個月。
四.試劑的配制
試劑一工作液:用時加雙蒸水360mL,也就是10倍稀釋,得到400mL試劑一工作液;
試劑二工作液:用贈送的棕色瓶配制。試劑二工作液由試劑二加上100mL試劑一工作液配得,現(xiàn)配現(xiàn)用,注意避光;
試劑三工作液:試劑三工作液由試劑三溶解于100mL試劑一工作液配得,現(xiàn)配現(xiàn)用;
試劑四工作液:粉劑一支。用50mL雙蒸水溶解,搖勻后,取10mL,加入90mL試劑一,配成試劑四工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用,用贈送的棕色瓶盛裝。注意避光,配好的試劑請于2小時內(nèi)用完。
試劑五:陽性對照,按需配制,-20℃保存。
五.操作步驟
| 空白孔1 | 測定孔 | 對照孔2 |
試劑一(mL) | 1 |
| 1 |
試劑二工作液(mL) | 1 | 1 | 1 |
試劑三工作液(mL) | 1 | 1 |
|
樣品(mL) |
| 1 | 1 |
充分混勻
試劑四工作液(mL) | 1 | 1 | 1 |
充分混勻,室溫避光靜置5min使之充分反應(yīng)。560nm處,1cm光徑比色杯,采用分光光度計測定吸光值。
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