PCR完成后,建議將反應液于1000× g (大約4000 rpm) 離心1~3 min以沉淀血細胞碎片,之后取上清進行下游分析。該步驟可有效去除多種血液組分。當使用高濃度血液模板時此步尤為重要,因為經(jīng)過PCR循環(huán),反應管中會存在大量的血細胞碎片。這些碎片會干擾下游的檢測,如瓊脂糖電泳檢測。注意:由于血液本身的原因,PCR 結束后在 PCR 管的底部會出現(xiàn)透明凝膠狀物質,此為正?,F(xiàn)象。
氣單胞菌通用PCR試劑盒常見問題與解決方法
在PCR結果分析時,不管是陽性結果或陰性結果,如果沒有對照反應,都不能確定結果是否可靠。為了便于后續(xù)實驗結果的分析,建議在進行PCR時,設置陽性和陰性PCR對照反應以便于排除假陽性或假陰性的干擾。
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