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八臂迷宮實(shí)驗(yàn)方法-僅供參考

來源:長(zhǎng)沙百眾生物科技有限公司   2020年05月28日 13:51  

八臂迷宮(放射臂迷宮(radial arm maze))實(shí)驗(yàn)也是常用的評(píng)價(jià)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的模型之一,由Olton等人于20世紀(jì)70年代中期建立。其基本依據(jù)是,控制進(jìn)食的動(dòng)物受食物的驅(qū)使對(duì)迷宮各臂進(jìn)行探究;經(jīng)過一定時(shí)間的訓(xùn)練,動(dòng)物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時(shí)測(cè)定動(dòng)物的工作記憶(working memory)和參考記憶(reference memory)。所用動(dòng)物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對(duì)腦區(qū)毀損和多種藥物均很敏感。

(一) 實(shí)驗(yàn)設(shè)備  實(shí)驗(yàn)多數(shù)采用八臂放射迷宮,也有采用 十二臂或者二十四臂迷宮。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的八臂迷宮。每個(gè)臂長(zhǎng)41.9cm,寬11.4cm,高10.1cm;其上有一透明蓋,兩側(cè)各有兩個(gè)相對(duì)的光電管。迷宮中央八角形區(qū)的直徑為27.4cm;上有一透明頂蓋。中央?yún)^(qū)通往各臂的入口處有一活動(dòng)門,用來對(duì)動(dòng)物的出入臂進(jìn)行控制。迷宮與計(jì)算機(jī)相聯(lián)。也可用攝像跟蹤系統(tǒng)(video tracking system)取代光電管來記錄動(dòng)物在迷宮內(nèi)的活動(dòng)行為。放置迷宮的房間內(nèi)有一些外部暗示(extramaze cues)。動(dòng)物在迷宮內(nèi)可以看見這些暗示,并借此進(jìn)行空間定位。實(shí)驗(yàn)用大鼠或小鼠進(jìn)行。

(二)實(shí)驗(yàn)方法

1.動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后,稱重,禁食24小時(shí)。此后每天訓(xùn)練結(jié)束后限制性地給予正常食料(據(jù)體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。

2.第二天,迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時(shí)將4只動(dòng)物置于迷宮中央(通往各臂的門打開)。讓其自由攝食、探究10min。

3.第三天,重復(fù)第二天的訓(xùn)練。這一過程讓動(dòng)物在沒有很強(qiáng)的應(yīng)激條件下熟悉迷宮環(huán)境。

4.第四天起,動(dòng)物單個(gè)進(jìn)行訓(xùn)練:在每個(gè)臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動(dòng)物自由攝食。食粒吃完或10min后將動(dòng)物取出。

5.第五天,將食物放在食盒內(nèi),重復(fù)前一天的訓(xùn)練,一天2次。

6.第六天以后,隨機(jī)選4個(gè)臂,每個(gè)臂放一顆食粒;各臂門關(guān)閉,將動(dòng)物放在迷宮中央;30s后,臂門打開,讓動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒,直到動(dòng)物吃完所有4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實(shí)驗(yàn)終止。每天訓(xùn)練兩次,其間間隔1h以上。

記錄以下幾個(gè)指標(biāo):

○1工作記憶錯(cuò)誤(working memory errors)次數(shù),即在同一次訓(xùn)練中動(dòng)物進(jìn)入食物臂的總次數(shù)-1次;

○2參考記憶錯(cuò)誤(reference memory errors )次數(shù),即動(dòng)物進(jìn)入不曾放過食粒的臂的總次數(shù);

○3總的入臂次數(shù);

○4成功進(jìn)入潛伏期,即動(dòng)物di一次進(jìn)入食物臂的時(shí)間;

○5錯(cuò)入潛伏期,即動(dòng)物di一次進(jìn)入未放食物的臂的時(shí)間;

此外,計(jì)算機(jī)還可記錄動(dòng)物在放射臂內(nèi)及中央?yún)^(qū)的活動(dòng)情況,包括運(yùn)動(dòng)距離和運(yùn)動(dòng)時(shí)間等。

連續(xù)5次訓(xùn)練的工作記憶錯(cuò)誤為零、參考記憶錯(cuò)誤不超過1次時(shí),可以開始藥物測(cè)試或腦內(nèi)核團(tuán)結(jié)構(gòu)毀損實(shí)驗(yàn)。一般先給溶劑(如生理鹽水),再給削弱記憶的藥物(如東~~~~MK-801等),然后加用增強(qiáng)記憶的藥物,劑量由低到高。

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