上海信帆為您甄選：western blot檢測中異常實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析！

來源：上海信帆生物科技有限公司 2020年06月18日 10:15

上海信帆為您甄選：western blot檢測中異常實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析！

上海信帆生物提供western blot檢測服務(wù)，很多老師自己做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候會(huì)出現(xiàn)各種異常情況，本公司把可能導(dǎo)致的原因做了一個(gè)整理匯總，希望對廣大剛?cè)腴T的用戶有所幫助，下面就讓我們一起來看看吧！

關(guān)于Western blot實(shí)驗(yàn)異常分析

『無信號(hào)』

原因	建議
一抗與二抗不匹配	選擇針對一抗來源種屬制備的二抗；
一抗不識(shí)別目的的種屬的蛋白	1)檢查抗體的說明書，適用范圍內(nèi)是否包含目的種屬 2)使用陽性對照來檢查抗體質(zhì)量
一抗或二抗不足，沒有足夠的抗體結(jié)合到目的蛋白	1)降低抗體稀釋倍數(shù)，增加抗體濃度 2)延長孵育時(shí)間
封閉劑與一抗有交叉反應(yīng)	改變封閉劑
抗原不足	1)每個(gè)泳道加入20-30ug總蛋白 2)制備樣品要使用蛋白酶抑制物及使用陽性對照
在檢測的組織內(nèi)目的蛋白表達(dá)水平低	檢測樣本不表達(dá)目的蛋白選擇表達(dá)量高的細(xì)胞作為陽性對照，用于確定檢測樣本是否為陰性，也可更換細(xì)胞系
蛋白轉(zhuǎn)膜效率低	1)利用麗春紅檢測轉(zhuǎn)膜效率;檢查轉(zhuǎn)移裝置是否電極弄反 2)轉(zhuǎn)移前膜是否用甲醇侵泡過
膜過渡洗滌	減少洗滌時(shí)間和強(qiáng)度
疊氮鈉抑制二抗活性	二抗稀釋液內(nèi)不用疊氮鈉

『沒有特異條帶』

原因	建議
細(xì)胞系傳代過多后蛋白表達(dá)譜發(fā)送變化	1)使用未傳代或傳代次數(shù)較少的細(xì)胞系進(jìn)行樣品制備
蛋白本身有很多修飾	1)查閱文獻(xiàn)，確定目的蛋白是否存在多種修飾
蛋白被消化或者降解	1)蛋白樣品確保未被污染，確保含有蛋白酶抑制劑
所檢測蛋白存在多種剪接體，導(dǎo)致分子量大小不同	1)查閱文獻(xiàn)或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
一抗或二抗?jié)舛雀?/td>	1)減低抗體濃度
洗滌不夠	1)充分洗滌

『條帶大小不正確』

原因	建議
目的蛋白被降解	確保蛋白樣品未被污染，確保含有蛋白酶抑制劑
存在不同的剪接體	查閱文獻(xiàn)或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
重組蛋白	檢測是否存在額外加入的蛋白
特殊蛋白如MDM2等	仔細(xì)閱讀抗體說明書

上海信帆為您甄選：western blot檢測中異常實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析！

western blot檢測服務(wù)

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影