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所謂分光，是利用色散現(xiàn)象可以將波長(zhǎng)范圍很寬的復(fù)合光分散開(kāi)來(lái)，成為許多波長(zhǎng)范圍狹小的“單色光”，這種作用稱為“分光”。像我們所知的，使用棱鏡可以將太陽(yáng)光分解為七色光，彩虹的形成就是為人所熟知的分光現(xiàn)象。
分光不同于棱鏡分光（折射法）一種。但其他的分光現(xiàn)象一般需要較為復(fù)雜的方法實(shí)現(xiàn)，不太常見(jiàn)。具體的類型如下：
1）利用棱鏡來(lái)分光（光的折射率依賴于波長(zhǎng)）；
2）利用衍射現(xiàn)象來(lái)分光；
3）利用法布里-珀羅標(biāo)準(zhǔn)具來(lái)分光；
4）利用邁克爾遜干涉+傅立葉變換的傅立葉分光：
5）利用光散射的分光。
分光光度計(jì)使用了兩個(gè)部分來(lái)實(shí)現(xiàn)其檢測(cè)的功能。第一部分是分光，將所使用的特定光源所發(fā)出的復(fù)合光分解為“單色光”，這些光通過(guò)樣品，一部分光會(huì)被吸收或反射。第二部分是檢測(cè)裝置，對(duì)通過(guò)了樣品的光進(jìn)行分析，可以了解到某一波長(zhǎng)段的光會(huì)出現(xiàn)大幅減少或其他的變化。這些變化的原因正是樣品中含有某些特定的物質(zhì)造成的。
分光光度計(jì)的具體使用方法：
（1）儀器預(yù)熱。打開(kāi)樣品室蓋（光門(mén)自動(dòng)關(guān)閉）。開(kāi)啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20 min。選擇開(kāi)關(guān)置于“T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。
（2）旋動(dòng)波長(zhǎng)手輪，把所需波長(zhǎng)對(duì)準(zhǔn)刻度線。
（3）將裝有溶液的比色皿放置比色架中，令參比溶液置于光路。
（4）蓋上樣品室蓋，調(diào)節(jié)透光率“100％T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T”。（如顯示不到100％T，則可加按一次。
（5）吸光度A的測(cè)量：儀器調(diào)T為0和100％后，將選擇開(kāi)關(guān)轉(zhuǎn)換至A調(diào)零旋鈕，數(shù)字顯示應(yīng)為“.000”。然后拉出拉桿，使被測(cè)溶液置入光路，數(shù)字顯示值即為試樣的吸光度A。
（6）測(cè)定完畢后，先打開(kāi)樣品室蓋，再斷電源。比色杯應(yīng)清洗干凈后，再貯放保存。
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