蛋白提取系列專題

-多方位獲取您所需要的樣本蛋白

背景介紹

蛋白質(zhì)種類很多，在理化特性方面差異較大，因此不可能有一個(gè)固定的程序適用各類蛋白質(zhì)的分離。動(dòng)物蛋白提取一般遵循如下原則：盡可能提高蛋白的溶解度，抽提大量的總蛋白，減少蛋白質(zhì)的損失；減少對(duì)蛋白質(zhì)的人為修飾；破壞蛋白與其他生物大分子的相互作用，并使蛋白質(zhì)處于*變性狀態(tài)。

產(chǎn)品信息

1、裂解液形式：

RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer，放射免疫沉淀法裂解緩沖液）是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細(xì)胞或組織的快速裂解液，其原理為利用表面活性劑等裂解細(xì)胞膜（包括核膜），從組織或動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實(shí)驗(yàn)。

2、Kit形式：

蛋白提取實(shí)驗(yàn)是蛋白功能研究，客戶可購(gòu)買商品化的蛋白提取試劑盒。圖1簡(jiǎn)單的介紹了不同部位蛋白提取所利用的提取試劑盒，并且需要注意以下事項(xiàng)：

（1）所要研究的樣本種屬----動(dòng)物 、植物、細(xì)菌、真菌、昆蟲(chóng)、酵母等；

（2）蛋白獲得的部位----總蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等；

（3）下游的實(shí)驗(yàn)---考慮提取得到蛋白的活性等；

圖1 細(xì)胞不同組織部位蛋白提取

產(chǎn)品特點(diǎn)

FAQ

1.如何選擇合適的RIPA裂解液？

如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP，我們建議您使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)，該裂解液在裂解細(xì)胞或組織后一般不會(huì)形成粘滯的透明狀DNA團(tuán)塊，不必采用超聲處理就可進(jìn)行下一步操作。同時(shí)，該裂解液還適用于磷酸化蛋白的WB檢測(cè)。

如果使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)的效果不是很好，那您的蛋白可能比較特殊，我們建議您可以嘗試另外幾種裂解液。如果您的蛋白是難溶性的蛋白，建議您可以嘗試使用裂解強(qiáng)度更高的裂解液，如RIPA裂解液(強(qiáng)/中)；如果您在做IP實(shí)驗(yàn)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)背景很高，即有很多非特異性蛋白被IP下來(lái)，這時(shí)候您需使用裂解強(qiáng)度較強(qiáng)的裂解液，比如RIPA裂解液(強(qiáng)/中)。反之，如果您發(fā)現(xiàn)目的蛋白無(wú)法IP下來(lái)，則說(shuō)明您使用的裂解液強(qiáng)度過(guò)強(qiáng)，此時(shí)需使用裂解強(qiáng)度較弱的裂解液，比如RIPA裂解液(弱)。

2. RIPA裂解液可以獲得細(xì)胞中的不同蛋白嗎？

RIPA裂解液提取的是全蛋白，包括核蛋白、漿蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白（如：核蛋白、膜蛋白）則可利用專門提這類蛋白的試劑盒進(jìn)行提取。

文獻(xiàn)引用

[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.

20126ES50 和20101ES60  IF:4.522

[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.  

20126ES50   IF:4.522

[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.    

20127ES50   IF:4.18

[4] Wang Y, Li X, Gong X, et al. MicroRNA-322 Regulates Self-renewal of Mouse Spermatogonial Stem Cells through Rassf8[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(4): 857.  

RIPA   IF: 4.067

[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.

RIPA   IF: 3.648

[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.  

20126ES50  IF: 3.559

訂購(gòu)信息

相關(guān)產(chǎn)品

HB200619