影響色譜柱運用的要素
不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。其實,在作業(yè)過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。當活動相pH超出堿性范圍時,會加速硅膠的溶解而釋放出絮狀物堵塞柱子;當活動相pH值超出酸性范圍時,鍵合相易發(fā)生水解而流失,這兩種反應均是不行逆反應,特別是在溫度較高(>40℃)的環(huán)境下,會使柱效敏捷下降而報廢。
當前運用為廣泛的是硅基鍵合相填料,當以水溶液作為活動相或活動相中含有一定濃度的磷酸鹽緩沖液時,水溶液中或緩沖鹽溶液中會滋生出一些細菌或霉菌,從而堵塞固定相顆粒間的空地。特別是關于多元自動份額混合的液相色譜儀來說,水相或緩沖鹽相獨立存貯,因寄存時刻較長而簡略發(fā)生此類問題。
現(xiàn)在,廣泛運用的填料顆粒粒徑范圍在3~10μm,孔徑在6~10nm,色譜柱在運用中會有大量的活動相經(jīng)過,如活動相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒,則很簡略在柱頭部位被截留,久而久之,形成色譜柱機械性堵塞,引起柱壓升高而無法正常運用。
影響色譜柱壽命的要素許多,除活動相和樣品要素外,還有其它一些外在要素,如,柱壓的影響,溫度的影響,色譜柱的正確沖刷,色譜柱的正確裝置等。
防備措施
為了下降色譜柱的損害問題,大家在運用色譜柱時能夠做一些防備。例如:
在線過濾器的內(nèi)部顆??盏匾话闶?.5微米,關于UHPLC會挑選0.2微米空地的在線過濾器。這個空地尺度和柱頭的過濾篩板尺度挨近或許略小。
維護柱有許多種,通用型、一體式、卡套式,可是它其實是一個和剖析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
有一些液相的剖析方法沒有明確標注樣品的凈化,但期望大家在做剖析時都能夠考慮樣品的凈化,常用的方案是對樣品進行過濾。
保存
1、短期保存
2、長期保存
將色譜柱按照說明書保存在對應的溶劑中,而且將色譜柱從體系中去下,兩端用堵頭密封。
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