做轉(zhuǎn)染試驗(yàn)時小編就抱著一個信仰，就是要給細(xì)胞點(diǎn)“色彩”看（熒光），但你知道嗎？就這個簡單的試驗(yàn)進(jìn)程，小小的細(xì)胞卻有著大大的能量，試驗(yàn)進(jìn)程中帶陽離子的脂質(zhì)體充當(dāng)著“搬運(yùn)工”的角色將質(zhì)粒從胞外“抓”到胞內(nèi)，而細(xì)胞為質(zhì)粒的仿制、轉(zhuǎn)錄、翻譯提供“場所和原材料”，自己也跟著“增光填色”,但“上色”進(jìn)程中會遇到一些問題，總結(jié)下來主要有以下二個方面：

細(xì)胞狀況差

轉(zhuǎn)染功率低

1：轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀況較差

A：剖析：主要是鋪板和反響液配制的原因

細(xì)胞狀況是整個試驗(yàn)的要害，假如細(xì)胞狀況欠好，則轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀況當(dāng)然就好不了

鋪板：過多或不均勻，細(xì)胞長的太滿就會狀況較差

脂質(zhì)體本身有毒性，假如脂質(zhì)體加入量太多，會導(dǎo)致細(xì)胞狀況較差，或者細(xì)胞死亡，主張在做正式試驗(yàn)前，先做一下預(yù)試驗(yàn)，探索一下質(zhì)粒和脂質(zhì)體的配比。

2：轉(zhuǎn)染后熒光功率低

A：剖析：主要是細(xì)胞原因和“搬運(yùn)”進(jìn)程中的問題

1、細(xì)胞狀況仍然是重中之重，假如有一段時間轉(zhuǎn)染效果很不理想，必需求換一批次細(xì)胞；

2、加入意圖質(zhì)粒后悄悄混勻，太用力會損壞混合液的結(jié)構(gòu)，

3、質(zhì)粒與轉(zhuǎn)染試劑的比值： 過高一部分質(zhì)粒不能進(jìn)入細(xì)胞，過低“搬運(yùn)工”太多，有毒性且浪費(fèi)；

4、吸、打液體時注意槍頭內(nèi)液面高度，是否*打出；

5、反響液配好后等待20min，質(zhì)粒才會被*包裹；

 6、反響液滴加加入細(xì)胞，使“脂質(zhì)體+質(zhì)粒”均勻分布；

7、質(zhì)粒重復(fù)凍融影響濃度，盡量削減凍融次數(shù)；脂質(zhì)體 -20℃保存，用完應(yīng)立刻放回；

8、必要時需求檢測一下質(zhì)粒的濃度是否精確；