主要用途
通用型DNA1.8%瓊脂糖凝膠電泳試劑是一種旨在使用瓊脂糖作為介質(zhì),進(jìn)行常規(guī)低分子50至1000堿基DNA 電泳的基本技術(shù)方法。產(chǎn)品即到即用,無(wú)核酶污染,性能穩(wěn)定,重復(fù)性好,簡(jiǎn)化操作,建立標(biāo)準(zhǔn)化體系。
技術(shù)背景
瓊脂糖(agarose)或聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE)是分離、識(shí)別和純化核酸分子的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為支持介質(zhì)的一種電泳方法,其兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠約可區(qū)分相差100堿基的DNA的片段,其分辨率比聚丙烯酰胺凝膠低,但分離范圍廣。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達(dá)107bp的DNA的片段。瓊脂糖凝膠電泳濃度通常在0.5~2%之間,低濃度的用來(lái)進(jìn)行大片段核酸的電泳,高濃度的用來(lái)進(jìn)行小片段分析。
產(chǎn)品內(nèi)容
膠體液(Reagent A) 毫升
電泳液(Reagent B) 毫升
上樣液(Reagent C) 微升
染色液(Reagent D) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管:用于樣品處理
無(wú)離子水:用于染色
DNA標(biāo)準(zhǔn)樣:用于核酸電泳的片段大小的參照
電泳儀:用于電泳運(yùn)行
實(shí)驗(yàn)操作
實(shí)驗(yàn)開始前,將冰箱里的試劑置于室溫下均衡溫度。然后進(jìn)行下列操作。
- 將膠體液(Reagent A)置于微波爐里加熱融化(注意:實(shí)時(shí)觀察融化狀況,避免過(guò)度融化和溢出)
- 即刻倒入適量的膠體液(Reagent A)到膠體制備板內(nèi),避免氣泡
- 插入孔梳
- 在室溫下孵育45分鐘,或直至膠體凝結(jié)
- 將膠體板移入到電泳槽里
- 加入適量的電泳液(Reagent B)
- 小心拔去孔梳
- 移取10微升樣品至1.5毫升離心管
- 加入xx微升上樣液(Reagent C),混勻
- 加入到膠體樣品孔里
- 接上電源后電泳:電壓為100伏,運(yùn)行1小時(shí),或直至溴酚藍(lán)(Bromophenol Blue)染料前沿到達(dá)膠底前1厘米處
- 準(zhǔn)備200毫升用戶自備的無(wú)離子水
- 加入xx微升染色液(Reagent D),混勻
- 放進(jìn)膠體,置于平式搖蕩儀上,室溫下孵育30分鐘,速度為50RPM,避免光照
- 在標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光下進(jìn)行觀察,并拍照記錄
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為10次操作
- 操作時(shí),須戴手套
- 染色液(Reagent D)具有毒性,注意操作安全
- 使用時(shí),避免對(duì)母液的污染
- 電泳液(Reagent B)可以重復(fù)使用
- 本公司提供系列電泳分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)核酶和蛋白酶污染
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