Invitrogen品牌代理山羊抗豚鼠IgG（H + L）高度交叉吸附二級抗體，Alexa Fluor 488的產(chǎn)品說明。

貨號：A-11073

產(chǎn)品特定信息
為了大程度地減少交叉反應(yīng)，已對這些山羊抗豚鼠IgG（H + L）完整二級抗體進(jìn)行了親和純化，并針對牛，雞，山羊，倉鼠，人，小鼠，兔，大鼠和綿羊的血清進(jìn)行了交叉吸附進(jìn)行共軛。交叉吸附或預(yù)吸附是純化步驟，可提高抗體的特異性，從而提高靈敏度并減少背景染色。使第二抗體溶液通過含有固定血清的柱基質(zhì)來自潛在交叉反應(yīng)物種的蛋白質(zhì)。只有非特異性結(jié)合的二抗被捕獲在色譜柱中，高特異性的二抗流過。這個額外步驟的好處在多重/多色實驗（例如流式細(xì)胞術(shù)）中很明顯，在其中可能與其他一抗發(fā)生交叉反應(yīng)，或者在組織/細(xì)胞熒光染色實驗中可能存在內(nèi)源性免疫球蛋白。

Alexa Fluor染料是當(dāng)今受信任的熒光染料之一。Invitrogen™Alexa Fluor 488染料是一種明亮的綠色熒光染料，具有激發(fā)光，非常適合488 nm激光線。為了在成像和流式細(xì)胞儀中穩(wěn)定產(chǎn)生信號，Alexa Fluor 488染料在很寬的摩爾范圍內(nèi)對pH值不敏感。具有高熒光量子產(chǎn)率和高光穩(wěn)定性的探針可以以高靈敏度檢測低豐度生物結(jié)構(gòu)。Alexa Fluor 488染料分子可以高摩爾比連接到蛋白質(zhì)上，而無需明顯的自猝滅，可實現(xiàn)更亮的結(jié)合物和更靈敏的檢測。每個綴合物的標(biāo)記程度通常是每個IgG分子2-8個熒光團(tuán)分子；每個產(chǎn)品批次的分析證書上均會標(biāo)明確切的標(biāo)簽等級。

使用結(jié)合物溶液：使用前，將蛋白結(jié)合物溶液在微量離心機(jī)中短暫離心；僅將上清液添加到實驗中。此步驟將有助于消除在存儲過程中可能形成的任何蛋白質(zhì)聚集體，從而減少非特異性背景染色。由于染色方案隨應(yīng)用而變化，因此應(yīng)憑經(jīng)驗確定抗體的適當(dāng)稀釋度。對于熒光團(tuán)標(biāo)記的抗體，對于大多數(shù)免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用而言，終濃度為1-10 µg / mL應(yīng)該是令人滿意的。