直接PCR——PCR反應(yīng)中的快速之“王”

PCR技術(shù)是一種包括生命科學(xué)在內(nèi)多個(gè)領(lǐng)域頻繁使用的一種技術(shù)。而PCR技術(shù)在發(fā)展過(guò)程中有了幾次大的技術(shù)革新，如熱穩(wěn)定Taq酶的發(fā)現(xiàn)、自動(dòng)控溫PCR儀的推出、PCR mix的出現(xiàn)，每一次革新的出現(xiàn)都使得PCR技術(shù)更加簡(jiǎn)便與易于操作。

Part1：直接PCR所謂何意？

直接PCR（Direct PCR）是一種不經(jīng)核酸提取而直接使用動(dòng)物或植物組織等直接進(jìn)行擴(kuò)增的反應(yīng)。在許多方面，直接PCR的工作方式類似于常規(guī)PCR。主要區(qū)別是直接PCR中使用的定制緩沖液，樣本可不經(jīng)過(guò)核酸抽提，直接進(jìn)行PCR反應(yīng)，但對(duì)于參與直接PCR反應(yīng)酶的耐受性和buffer的兼容性有相對(duì)應(yīng)的要求。盡管常見(jiàn)的樣品中或多或少都會(huì)存在PCR抑制劑，但在酶和buffer的作用下直接PCR仍可實(shí)現(xiàn)可靠的擴(kuò)增。而傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)需要以高質(zhì)量的核酸為模板進(jìn)行反應(yīng)，如模板中含有蛋白以及其他雜質(zhì)時(shí)就會(huì)抑制PCR反應(yīng)的順利進(jìn)行。

Part2“直”接了當(dāng)

核酸提取技術(shù)愈發(fā)成熟，對(duì)應(yīng)所需要的配套儀器就越固化，技術(shù)的一體化導(dǎo)致單次的檢測(cè)成果過(guò)高。而一些欠發(fā)達(dá)地區(qū)的并不具備成熟的核酸提取配套儀器及實(shí)驗(yàn)室，以及在性疾病流行大背景下，直接PCR的需求劇增。

目前的PCR檢測(cè)方法所需時(shí)間較長(zhǎng)，樣品如咽拭子、血液等需經(jīng)核酸提取后再進(jìn)行檢測(cè)及報(bào)告發(fā)放，整體拉長(zhǎng)了診斷時(shí)間。直接PCR使用簡(jiǎn)單，不需要額外培訓(xùn)專業(yè)的檢測(cè)人員，可直接將樣品簡(jiǎn)單稀釋即可同時(shí)還避免了因如核酸提取操作等出現(xiàn)的假陰性結(jié)果。

Part 3： 狀況“直”出

早在1993年之前，直接PCR就被用于微生物領(lǐng)域中分析中，今天分子實(shí)驗(yàn)室中所采用的菌落PCR鑒定就是直接PCR法的直接的體現(xiàn)。可直接樣品簡(jiǎn)單處理或者稀釋即可進(jìn)行PCR反應(yīng)。

2019年新///冠病毒出現(xiàn)，并且迅速席卷造成重大損失。隨后非洲豬瘟又卷土重來(lái)，造成生豬產(chǎn)業(yè)的重大損失。想要控制疫情，檢測(cè)是重中之重。而在此次的疫情期間，分子檢測(cè)揭開(kāi)了其神秘的面紗進(jìn)入人們的視野中。一方面是疫情期間分子檢測(cè)的需求攀升，另一方面是攀升的需求使得衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的運(yùn)行負(fù)荷驟增。因此開(kāi)發(fā)快速檢測(cè)技術(shù)是各家IVD企業(yè)爭(zhēng)相搶奪的高地。而直接PCR更是快速分子檢測(cè)技術(shù)中的一匹黑馬。

直接PCR的核心就是具有高度耐受的聚合酶，可直接對(duì)樣本中的核酸分子進(jìn)行檢測(cè)。翊圣生物研發(fā)的直接PCR系列具有優(yōu)////秀的耐受抑制組分，有針對(duì)不同樣品如動(dòng)物組織、動(dòng)物全血等PCR產(chǎn)品，助力快速檢測(cè)。

HB200910