自抽連續(xù)離心技術是1981年聯(lián)邦德國的L.deMaeyer教授在歐洲分子生物學實驗室(European Molecular Biology Laboratory,Heidelberg,West Germany)提出。在該技術中影響離心分離效果的操作參數只有一個,即離心機的轉速。這樣,實現(xiàn)了影響離心效果的操作參數從兩個到一個的進步。
目前制備離心根據進樣是否連續(xù)可分為兩種:分批離心(batch centrifugation)和連續(xù)離心(continuous-flow centrifugation)。在分批離心中,分離效果受離心機轉子轉速和分離時間的影響,在連續(xù)離心中則與轉速和流量有關。
假如要把均勻地懸浮在某一液體中大小不同的兩種顆粒分離開,在分批離心(如在差速離心和速率區(qū)帶離心)中,離心機轉速和分離時間這兩個操作參數的任何變化都將影響分離效果;同樣,在連續(xù)離心中,轉速和流量任何變化也將影響分離效果。通過對轉速和分離時間或轉速和流量兩個操作參數分別嚴格控制,才會降低分離不清的現(xiàn)象,即“污染”。
自抽連續(xù)離心的目的是把離心場的離心分離特性與離心抽吸作用結合,產生自抽連續(xù)流動離心(self-fuction continuous-flow centrifugation,亦稱self-pumping continous-flow centrifugation,以后簡稱自抽連續(xù)離心),使其轉速是*操作參數。
在自抽連續(xù)離心中,離心機分離效果主要取決于懸浮液中顆粒的特性和轉子流體通道的幾何形狀。選擇適當的幾何形狀,可使具有某沉降系數的顆粒的澄清度對轉速變化不敏感,即轉速的變化對離心效果的影響小。
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