分歧巴貝斯蟲PCR試劑盒反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

相關(guān)產(chǎn)品信息：

YSBIO YS00P338 50T 盒 歐洲放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P339 50T 盒 戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P340 50T 盒 衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P341 50T 盒 內(nèi)氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P342 50T 盒 化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P343 50T 盒 放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P344 50T 盒 腺伴隨病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P345 50T 盒 腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P346 50T 盒 腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P347 50T 盒 腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P348 50T 盒 腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P349 50T 盒 腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P350 50T 盒 腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P351 50T 盒 腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P352 50T 盒 嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

YSBIO YS00P353 50T 盒 斑點(diǎn)氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒