規(guī)格:100 管/96 樣
酸性土壤*磷試劑盒說明書
微量法
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷, 土壤中*磷是限制植物生長(zhǎng)主要因子之一。
測(cè)定原理
用雙酸法提取酸溶性磷和吸附態(tài)磷,用鉬銻抗比色法測(cè)定。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制
提取液:液體 105mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加 0.2mL 蒸餾水溶解。試劑二:液體 0.4mL×1 支,4℃保存。
工作液:臨用前將試劑一和試劑混合,加 19.4mL 蒸餾水混勻。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干,過20目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取 1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作表
| 空白管 | 測(cè)定管 |
樣本(μL) |
| 20 |
提取液(μL) | 20 |
|
工作液(μL) | 180 | 180 |
充分混勻,25℃靜置 30min | ||
于微量石英比色皿/96 孔板,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定 700nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白管和 A 測(cè)定管,△A=A 測(cè)定管-A 空白管 |
注意:空白管只需測(cè)定一次。
計(jì)算公式
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下 標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.2585x-0.3007,R2=0.9903
*磷含量(mg/kg)=(△A+0.3007)÷ 0.2585×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 38.68×(△A+0.3007)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g
b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.1293x-0.3007,R2=0.9903
*磷含量(mg/kg)=(△A+0.3007)÷ 0.1293×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 77.36×(△A+0.3007)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng)
1. 配好的試劑 3 天內(nèi)使用完。
2. 低檢出限為 1.16mg/g。
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